[KO Validado] Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-Lamina A/C para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P02545

Especificações Principais e Parâmetros do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Lamin A/C

• As laminas são proteínas de filamento intermediário que formam a lâmina nuclear, uma rede fibrosa que se localiza abaixo da membrana nuclear interna, proporcionando suporte estrutural e organizando a cromatina. A lamin A e a lamin C, ambas codificadas pelo gene LMNA por splicing alternativo, são componentes principais dessa estrutura e estão presentes em quantidades aproximadamente iguais. Referências relacionadas: PMID:10080180 PMID:10580070 PMID:10587585

• A lâmina nuclear atua como um suporte estrutural para o envelope nuclear, ancorando a cromatina e os complexos de poros nucleares, e desempenha um papel na replicação do DNA, na transcrição e na montagem nuclear. A Lamin A/C também contribui para a rigidez mecânica nuclear e a mecanorresposta celular. Referências relacionadas: PMID:23990565 PMID:25127216

• A fosforilação dependente do ciclo celular regula a desmontagem da lâmina durante a mitose e a remontagem na telófase, garantindo a dinâmica adequada do envelope nuclear. Referências relacionadas: PMID:2188730 PMID:2344612

• A Lamin A/C participa do reparo de quebras duplas do DNA, estabilizando as extremidades quebradas do DNA e prevenindo a translocação cromossômica, interagindo com fatores de reparo como o XRCC4. Referências relacionadas: PMID:31548606

• A Lamin A/C é essencial para o desenvolvimento do sistema nervoso periférico e do músculo esquelético, a proliferação de células satélite musculares, a osteoblastogênese e a formação óssea. Ela também previne a infiltração gordurosa do músculo e da medula óssea, mantendo o volume e a força do tecido. Referências relacionadas: PMID:10080180 PMID:10814726 PMID:11799477 PMID:12075506 PMID:15317753 PMID:18611980 PMID:10587585

• No sistema cardiovascular, o acúmulo de prelamina-A/C nas células do músculo liso vascular (VSMCs) acelera a senescência, perturba a mitose e induz danos ao DNA, contribuindo para a patologia vascular relacionada à idade. A Lamin A/C também é necessária para a homeostase cardíaca. Referências relacionadas: PMID:20458013 PMID:10580070 PMID:12927431 PMID:18611980

• Subcelularmente, a lamin A/C está localizada principalmente na lâmina nuclear, mas também encontrada no nucleoplasma, matriz nuclear e speckles nucleares, refletindo seus papéis dinâmicos. Nas artérias, a prelamina-A/C se acumula com a idade e a doença, particularmente nas lesões ateroscleróticas, colocalizando com VSMCs senescentes. A expressão aumenta devido à regulação negativa mediada por estresse oxidativo do ZMPSTE24.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 403–572 da lamin A/C humana) tem como alvo uma região C-terminal conservada entre a lamin A e a lamin C, tornando este anticorpo policlonado adequado para detectar ambas as isoformas em amostras humanas, de camundongo e de rato. A validação KO verifica a especificidade.
• Para Western blotting, o peso molecular esperado é de ~74 kDa para a lamin A; a lamin C pode aparecer em torno de ~65 kDa. Considere carregar proteína adequada e usar condições de lise apropriadas, pois a solubilidade da lamin pode ser afetada pela força iônica e pelo detergente.
• Na imunofluorescência e na IHC, a lamin A/C cora principalmente a periferia nuclear (lâmina). As condições de permeabilização e fixação devem ser otimizadas para o tipo de célula ou tecido alvo.
• Para IP, o anticorpo pode capturar complexos de lamin A/C; realize controles adequados.
• Como a lamin A/C sofre várias modificações pós-traducionais (por exemplo, fosforilação, acetilação), o tratamento com inibidores ou a indução de parada do ciclo celular pode alterar a detecção.

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