[KO Validado] Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-LDHA para WB, IF/ICC, ELISA - P00338

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da LDHA

• A LDHA (cadeia A da L-lactato desidrogenase) é uma enzima glicolítica chave que catalisa a interconversão estereoespecífica de piruvato e lactato, acoplada à renovação de NADH/NAD+.
• Também conhecida como subunidade muscular da LDH (LDH-M), é predominantemente expressa em tecidos anaeróbicos, como músculo esquelético e fígado, onde é necessário alto fluxo glicolítico.
• Localiza-se no citoplasma, consistente com seu papel no metabolismo citosólico.
• Passa por múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e ubiquitinação, que podem regular sua atividade, estabilidade ou parceiros de interação.
• O splicing alternativo produz múltiplos isoformas, embora suas diferenças funcionais ainda não tenham sido totalmente caracterizadas.
• Mutações na LDHA estão associadas à doença de armazenamento de glicogênio tipo XI (GSD11), destacando seu papel crítico no metabolismo energético.
• A proteína tem um peso molecular de aproximadamente 36,7 kDa (UniProt: 36689 Da), mas o anticorpo detecta uma banda entre 26-39 kDa, provavelmente devido a variações de isoforma ou PTMs.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 200-300 da LDHA humana. Esta região é conservada entre humano, camundongo e rato, explicando a ampla reatividade cruzada.
• As aplicações recomendadas incluem Western blot (WB), imunofluorescência/ICC (IF/ICC) e ELISA. Para WB, a banda detectada pode aparecer entre 26–39 kDa; considerando o PM previsto de ~36,7 kDa, valide a especificidade da banda em seu sistema de amostra.
• Considere usar lisados de tecido ou células apropriados que expressem LDHA, como músculo esquelético ou fígado, para controles positivos.
• Para imunofluorescência, a permeabilização é necessária, pois a LDHA é citoplasmática. Valide o padrão de coloração em linhagens celulares relevantes.

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