[KO Validado] Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-MAPKAPK3 para WB, IF/ICC, ELISA - Q16644

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da MAPKAPK3

• A proteína quinase ativada por MAP quinase 3 (MAPKAPK3), também conhecida como quinase do cromossomo 3p (3pK), é uma serina/treonina-proteína quinase ativada por estresse codificada pelo gene MAPKAPK3 em humanos.
• Desempenha um papel fundamental na produção de citocinas, endocitose, migração celular, remodelação da cromatina e regulação transcricional. Sob estresse, é fosforilada e ativada pela p38-alfa/MAPK14, levando à fosforilação do substrato.
• A MAPKAPK3 compartilha redundância funcional com a MAPKAPK2, exibindo a mesma especificidade de substrato, mas sua atividade quinase e níveis de expressão são mais baixos. Ambas fosforilam substratos como HSP27/HSPB1, KRT18, KRT20, RCSD1, RPS6KA3, TAB3 e TTP/ZFP36.
• A proteína se localiza tanto no núcleo quanto no citoplasma, permitindo seu envolvimento em diversos processos de sinalização.
• Amplamente expressa em tecidos, com níveis mais altos no coração e músculo esquelético; ausente no cérebro. Também é expressa no epitélio pigmentar da retina. Referências relacionadas: PMID:26744326
• Envolvida em respostas inflamatórias, regulando a produção de TNF e IL6 pós-transcricionalmente através da fosforilação de proteínas ligantes de elementos ricos em AU, como TTP/ZFP36, modulando a estabilidade e tradução do mRNA.
• Necessária para a macropinocitose aguda induzida por TLR em células dendríticas via fosforilação e ativação de RPS6KA3, e também atua como um modulador da repressão mediada por Polycomb.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação e acetilação; a proteína contém um domínio quinase de ligação a ATP e é classificada como uma transferase.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1-240) da MAPKAPK3 humana, o que pode contribuir para o reconhecimento da proteína de comprimento total (~43 kDa) no Western blot. Considere incluir controles positivos e negativos apropriados em seu experimento.
• O peso molecular previsto é de 43 kDa; no WB, espera-se uma banda próxima a este tamanho. Valide em seu sistema de amostra específico, pois modificações pós-traducionais ou isoformas podem causar pequenos deslocamentos.
• Para IF/ICC, observe que a MAPKAPK3 se localiza tanto no núcleo quanto no citoplasma; otimize as condições de fixação e permeabilização para preservar a antigenicidade. Recomenda-se uma contracoloração nuclear.
• No ELISA, o imunógeno recombinante (aa 1-240) pode servir como controle positivo; no entanto, a adequação do anticorpo para ELISA sanduíche deve ser validada com anticorpos pareados.
• A reatividade cruzada é prevista para humano, camundongo e rato com base na homologia de sequência; verifique o desempenho se for usado em outras espécies.

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