Anticorpo Monoclonal Anti-MLH1 Validado por KO para WB, IHC-P, ELISA - P40692

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de MLH1

• A proteína de reparo de incompatibilidades do DNA Mlh1 (homóloga 1 da proteína MutL) é a subunidade catalítica do sistema de reparo de incompatibilidades do DNA pós-replicativo (MMR), formando o heterodímero MutL alfa com PMS2 e o heterodímero MutL gama com MLH3.
• MutL alfa é recrutada ao DNA incompatível pelos complexos MutS alfa (MSH2-MSH6) ou MutS beta (MSH2-MSH3); em seguida, ativa a endonuclease PMS2 para introduzir quebras nas fitas, iniciando a remoção e o reparo da incompatibilidade.
• MLH1 localiza-se predominantemente no núcleo e está associada aos cromossomos durante os processos de replicação e reparo do DNA.
• É expressa em vários tecidos, incluindo cólon, linfócitos, mama, pulmão, baço, testículos, próstata, tireoide, vesícula biliar e coração.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação e conjugação de ubiquitina, que podem regular sua estabilidade e função.
• MLH1 é classificada como um supressor tumoral; mutações germinativas estão associadas ao câncer colorretal hereditário sem polipose (HNPCC), também conhecido como síndrome de Lynch.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 350–450 de MLH1 humano; a especificidade do epítopo deve ser verificada para as aplicações pretendidas.
• Para Western blot, o anticorpo detecta uma banda de aproximadamente 85 kDa; valide utilizando lisados celulares humanos ou de camundongo com expressão conhecida de MLH1 e inclua controles knockout, se disponíveis.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), otimize as condições de recuperação antigênica e a titulação; compare os padrões de coloração com a distribuição tecidual conhecida e utilize cortes de tecido knockout como controles negativos.
• Para ELISA, associe este anticorpo a um reagente de detecção adequado e valide utilizando proteína MLH1 recombinante para estabelecer a sensibilidade e a especificidade.

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