[KO Validado] Anticorpo Policlonal Coelho Anti-PAK2 para WB, IF/ICC, ELISA - Q13177

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PAK2

• PAK2 é uma serina/treonina-proteína quinase envolvida na regulação do citoesqueleto, motilidade celular, progressão do ciclo celular, apoptose e proliferação. Referências relacionadas: PMID:12853446, PMID:16617111, PMID:19273597
• Atua como um efetor downstream das pequenas GTPases CDC42 e RAC1; a ligação de GTPases ativas desencadeia mudança conformacional e autofosforilação. Referências relacionadas: PMID:7744004
• A forma completa do PAK2 promove sobrevivência e crescimento celular, enquanto o clivagem mediada por caspase gera o fragmento pró-apoptótico p34 que transloca para o núcleo e ativa a via JNK. Referências relacionadas: PMID:7744004, PMID:12853446, PMID:16617111, PMID:9171063
• O PAK2 fosforila diversos substratos incluindo MAPK4/6, JUN, histona H4 (facilitando a montagem do nucleossomo), BAD, proteína ribossomal S6 e CASP7. Referências relacionadas: PMID:21317288, PMID:21177766, PMID:21724829, PMID:21555521, PMID:27889207
• Além de sua atividade catalítica, o PAK2 se liga a ARHGEF7 e GIT1 para regular a orientação do fuso durante a mitose. Referências relacionadas: PMID:19273597, PMID:19923322
• A proteína localiza-se no citoplasma, núcleo, região perinuclear e membranas.
• Expressa de forma ubíqua, com níveis mais altos observados em músculo esquelético, ovário, timo e baço.
• O PAK2 sofre acetilação, miristoilação e ubiquitinação; é uma enzima alostérica com atividade de ligação a ATP e também é conhecido como p58, PAK65, gama-PAK e PAK-2.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting (WB), o peso molecular previsto do PAK2 de comprimento total é ~58 kDa; em condições apoptóticas, o fragmento clivado de ~34 kDa pode ser observado. Certifique-se de incluir controles apropriados.
• Na imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), o PAK2 exibe coloração citoplasmática e nuclear, com possível enriquecimento nas regiões perinucleares e membranas.
• Para ELISA, o imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1–212); combinar com anticorpos contra outros epítopos pode permitir o desenvolvimento de ELISA sanduíche.
• Como um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser verificada; considere usar linhagens celulares knockout para PAK2 como controles negativos para confirmar a especificidade em seus ensaios.
• Otimização padrão de bloqueio e diluição (por exemplo, começando em 1:500 para WB) é recomendada; testes empíricos no sistema de amostra relevante são essenciais.

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