Anticorpo Policlonal Coelho Anti-PHD2/EGLN1 Validado por KO para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9GZT9

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PHD2/EGLN1

• Egl nine homolog 1 (EGLN1), comumente conhecido como PHD2, é uma prolil hidroxilase do fator induzível por hipóxia (HIF) e o principal sensor de oxigênio em condições normóxicas.
• PHD2 catalisa a hidroxilação de resíduos específicos de prolina dentro dos domínios de degradação dependentes de oxigênio do HIF1A e HIF2A, levando à ubiquitinação mediada por VHL e degradação proteassomal.
• Sob hipóxia, a atividade do PHD2 é reduzida, permitindo a estabilização da subunidade HIFα, sua translocação nuclear e a ativação transcricional de genes envolvidos na angiogênese, eritropoiese e adaptação metabólica.
• A enzima pertence à família EGLN de dioxigenases e contém um motivo de dedo de zinco; requer ferro, 2-oxoglutarato e ascorbato como cofatores para sua função catalítica.
• Múltiplos isoformas são produzidos por splicing alternativo, e modificações pós-traducionais como acetilação, fosforilação e S-nitrosilação foram relatadas.
• Subcelularmente, o PHD2 localiza-se predominantemente no citoplasma, mas também pode ser detectado no núcleo.
• PHD2 é amplamente expresso, com os níveis mais altos no músculo esquelético, coração, cérebro e rim; também é encontrado em miócitos cardíacos, células endoteliais da aorta e músculo liso da artéria coronária.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente à região N-terminal (aa 1-100) do PHD2 humano; considere o uso de um peptídeo bloqueador para controles de especificidade.
• Para Western blotting, uma diluição inicial típica é de 1:500 a 1:2000; valide a diluição ótima no seu sistema de amostra e observe uma banda esperada em ~46 kDa.
• Para IHC-P, pode ser necessário recuperação antigênica; teste protocolos baseados em citrato ou EDTA e inclua controles positivos apropriados (por exemplo, tecido cardíaco ou muscular esquelético).
• Para IF/ICC, as condições de fixação e permeabilização devem ser otimizadas; PHD2 é detectado no citoplasma e núcleo.
• O anticorpo foi validado em amostras de KO; sempre inclua controles de nocaute (knockout) ou silenciamento (knockdown) ao investigar a especificidade do alvo.

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