[KO Validado] Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-PML para WB, IHC-P, ELISA - P29590

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PML

• Codificada pelo gene PML, a proteína PML também é conhecida como ligase E3 da proteína SUMO PML, proteína da leucemia promielocítica, proteína 71 contendo dedo RING e proteína 19 contendo motivo tripartido (TRIM19). Pertence à família TRIM e contém um domínio de dedo RING, uma caixa B, uma região de hélice enrolada e um domínio C-terminal sujeito a splicing alternativo, gerando múltiplas isoformas com funções distintas.
• Atua como a proteína estrutural essencial dos corpos nucleares de PML (PML-NBs), estruturas subnucleares dinâmicas que regulam a supressão tumoral, o controle transcricional, a apoptose, a senescência, as respostas a danos no DNA e a defesa antiviral, recrutando e modulando numerosas proteínas parceiras por meio de interações mediadas por SUMO.
• Inibe a exportação nuclear de mRNA mediada por EIF4E, reduzindo a afinidade de ligação de EIF4E ao cap 5' m7G dos mRNAs-alvo e, assim, controlando a expressão gênica no nível pós-transcricional. Referências relacionadas: PMID:11500381 PMID:11575918 PMID:18391071
• Funciona como uma ligase E3 da proteína SUMO, catalisando a conjugação de SUMO às proteínas substrato, incluindo proteínas virais de resposta imediata, e apresenta uma atividade robusta de sumoilação dependente da isoforma, especialmente nas isoformas PML-3 e PML-6. Referências relacionadas: PMID:20972456 PMID:28250117
• Múltiplas isoformas (PML-1 a PML-14) apresentam localizações subcelulares distintas: as isoformas nucleares (por exemplo, PML-4) localizam-se nos PML-NBs e no nucleoplasma, enquanto as isoformas citoplasmáticas (por exemplo, PML-14) associam-se ao retículo endoplasmático e às membranas dos endossomos iniciais, permitindo uma sinalização dependente do contexto nas vias do TGF-beta e em outras vias.
• As principais modificações pós-traducionais incluem sumoilação (essencial para a formação dos PML-NBs), fosforilação e acetilação, que modulam sua estabilidade, suas interações e suas funções supressoras de tumores.
• Apresenta ampla atividade antiviral contra vírus de DNA e RNA (por exemplo, herpesvírus, vírus da raiva, vírus da influenza e HCV) por meio de mecanismos específicos de cada isoforma, como sequestro do capsídeo viral, inibição da síntese de mRNA e proteínas virais e indução de apoptose em células infectadas.
• Desempenha um papel fundamental na senescência celular e na apoptose ao regular positivamente a estabilidade e a atividade de p53/TP53 e ao reprimir a transcrição de TBX2 por meio do complexo RBL2/E2F4, associando a PML à interrupção permanente do crescimento.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 300-600 da PML humana (isoforma 1), uma região central que se espera detectar em múltiplas isoformas; considere verificar a reatividade em seu sistema-modelo específico devido ao splicing alternativo.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 98 kDa, mas as isoformas e as espécies sumoiladas podem aparecer com pesos moleculares mais elevados; recomenda-se utilizar um marcador de peso molecular de proteína de alta qualidade e otimizar as condições de transferência.
• Este anticorpo é validado para confirmação de KO (knockout); certifique-se de incluir lisados de controle KO apropriados nos experimentos de WB para confirmar a especificidade da banda.
• Para IHC-P, as condições de recuperação antigênica (por exemplo, tampão citrato pH 6,0 ou EDTA pH 9,0) devem ser otimizadas, sendo aconselhável validar os padrões de coloração em relação à distribuição conhecida dos PML-NBs nos tecidos.
• Em aplicações de ELISA, considere utilizar o imunógeno recombinante como controle positivo para estabelecer a sensibilidade e a faixa linear.

CamelBio: Sua Ponte de Fornecimento Completa

A CamelBio fornece a fabricantes de diagnósticos e laboratórios de pesquisa acesso simplificado a um portfólio abrangente de matérias-primas para IVD, incluindo pares de anticorpos validados, anticorpos monoclonais e policlonais otimizados, reagentes auxiliares a granel e fornecimento especializado para alvos raros. Para pesquisas em oncologia e virologia focadas em PML, fornecemos anticorpos de alta qualidade e reagentes relacionados para apoiar o desenvolvimento de ensaios e estudos de biomarcadores, atuando como uma ponte confiável do conceito à aplicação clínica.