[Validado por KO] Anticorpo monoclonal de coelho anti-RhoGDI para WB e ELISA - P52565

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de RhoGDI (Rho GDP-dissociation inhibitor 1)

• RhoGDI (Rho GDP-dissociation inhibitor 1, também conhecido como Rho-GDI alfa, GDIA1, NPHS8, RHOGDI-1) é codificado pelo gene ARHGDIA (ID do gene: 396). Ele funciona como um regulador chave da homeostase das proteínas Rho ao controlar a reação de troca GDP/GTP.
• Ao inibir a dissociação do GDP das proteínas Rho, RhoGDI impede a ligação do GTP, mantendo assim pequenas GTPases como CDC42, RAC1 e RHOA em um pool citosólico inativo e protegendo-as contra degradação.
• RhoGDI apresenta afinidade excepcionalmente alta por proteínas Rho preniladas, o que permite extrair formas inativas e ativadas das membranas celulares e regular sua reciclagem e distribuição subcelular.
• Por meio da modulação da atividade da Rho GTPase, RhoGDI influencia a motilidade celular; em células de glioma, ele inibe a migração e invasão ao mediar sinais de SEMA5A e PLXNB3 que inativam RAC1.
• A proteína está predominantemente localizada no citoplasma, o que é consistente com seu papel de sequestrar Rho GTPases longe dos sítios de ativação ligados à membrana.
• As modificações pós-traducionais que afetam RhoGDI incluem acetilação e fosforilação, e ela é alvo de conjugação do tipo ubiquitina, podendo modular sua estabilidade e função.
• A isoforma canônica tem um peso molecular previsto de aproximadamente 23 kDa (calculado a partir da sequência: ~23,2 kDa). O splicing alternativo dá origem a isoformas adicionais, e a proteína é membro do proteoma de referência.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 70-150 da RhoGDI humana, uma região conservada entre humanos, camundongos e ratos, o que explica a reatividade cruzada observada.
• Para Western blotting, espera-se uma banda de aproximadamente 23 kDa; recomenda-se o uso de um gel de faixa de baixo peso molecular (por exemplo, 12-15% de acrilamida) para uma resolução ideal.
• Este anticorpo pode ser usado em ELISA; recomenda-se uma preparação de amostra adequada e otimização (por exemplo, concentração de revestimento de antígeno, condições de bloqueio) para resultados confiáveis.
• Como RhoGDI é uma proteína citoplasmática, os lisados celulares devem ser preparados com tampões de lise apropriados para garantir extração eficiente e evitar degradação do alvo.

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