[Validado por KO] Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-RhoGDI para WB, IF/ICC, ELISA - P52565

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RhoGDI

• O inibidor da dissociação de GDP de Rho 1 (RhoGDI, também conhecido como Rho-GDI alfa) é codificado pelo gene ARHGDIA (GDIA1) e é um regulador chave da sinalização da GTPase Rho.
• Ele inibe a dissociação do GDP das proteínas Rho, como CDC42, RAC1 e RHOA, mantendo-as assim em um pool citosólico inativo e protegendo-as da degradação.
• O RhoGDI participa ativamente da reciclagem e distribuição das GTPases Rho ativadas; sua afinidade excepcionalmente alta pelas formas preniladas permite que ele extraia moléculas inativas e ativadas das membranas.
• Através da modulação das proteínas Rho, o RhoGDI pode regular a motilidade celular; em células de glioma, ele inibe a migração e invasão mediando sinais SEMA5A/PLXNB3 que inativam o RAC1.
• A localização subcelular é predominantemente citoplasmática.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação; o splicing alternativo produz múltiplas isoformas, e a proteína está sujeita à ubiquitinação.
• Variantes de ARHGDIA associadas a doenças estão ligadas à síndrome nefrótica tipo 8 (NPHS8), destacando sua importância fisiológica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a proteína RhoGDI de comprimento total (aminoácidos 1–204), portanto, este anticorpo policlonal provavelmente reconhece múltiplos epítopos. Use controles positivos e negativos apropriados em todas as aplicações.
• No Western blot, espera-se uma banda específica em ~23 kDa. Confirme a reatividade usando proteína recombinante ou linhagens celulares com superexpressão ou knockout conhecidos.
• Para imunofluorescência/ICC, otimize as condições de fixação e permeabilização devido à localização citoplasmática. Inclua controles de isótipo para avaliar o fundo.
• O ELISA pode ser usado para detecção quantitativa; verifique a reatividade cruzada com outros membros da família RhoGDI se a especificidade do ensaio for crítica.
• O anticorpo é validado por KO, mas é aconselhável confirmar independentemente a especificidade em seu sistema experimental.

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