[Validado por KO] Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-SIRT1 para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q96EB6

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da SIRT1

• A SIRT1 é uma desacetilase de proteínas dependente de NAD que acopla a regulação transcricional ao estado energético celular, influenciando a progressão do ciclo celular, a resposta a danos no DNA, o metabolismo, a apoptose e a autofagia. Referências relacionadas: PMID:11672523 PMID:12006491 PMID:14976264

• Modula a estrutura da cromatina ao desacetilar histonas H1, H2A, H3 e H4, promovendo a repressão transcricional e a formação de heterocromatina silenciosa, particularmente em loci de rDNA. Referências relacionadas: PMID:15469825 PMID:18485871

• A SIRT1 desacetila uma infinidade de fatores de transcrição e co-reguladores, incluindo p53, FOXO3, NF-κB e MYC, regulando assim as respostas ao estresse, a sobrevivência celular e a proliferação. Referências relacionadas: PMID:11672523 PMID:12006491 PMID:14976264 PMID:15152190 PMID:21807113

• Atuando como um sensor da relação NAD+/NADH intracelular, a SIRT1 media adaptações metabólicas durante a restrição calórica, aumenta a gliconeogênese hepática e promove a oxidação de ácidos graxos no músculo esquelético. Referências relacionadas: PMID:15205477 PMID:15692560 PMID:23142079

• A SIRT1 participa no reparo de danos ao DNA ao desacetilar proteínas de reparo chave, como Ku70, NBN e WRN, e facilita o recrutamento de fatores de reparo para locais danificados. Referências relacionadas: PMID:15205477 PMID:16998810 PMID:17334224 PMID:20097625

• Desempenha um papel na autofagia ao desacetilar ATG5, ATG7 e LC3, e ajuda a manter o ritmo circadiano através da desacetilação de BMAL1 e PER2. Referências relacionadas: PMID:18296641 PMID:18662546

• Subcelularmente, a SIRT1 é predominantemente nuclear, enriquecida em corpos nucleares PML, mas também pode translocar para o citoplasma e mitocôndrias sob condições específicas.

• Amplamente expressa em tecidos humanos, a SIRT1 está criticamente envolvida na diferenciação do músculo esquelético, desenvolvimento neuronal e proteção cardiovascular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína SIRT1 humana recombinante de comprimento total; portanto, o anticorpo pode reconhecer todas as isoformas. Para validação por KO, certifique-se de que o éxon alvo esteja interrompido em seu modelo knockout.
• Para Western blot, espere uma banda principal em ~82 kDa. Use controles positivos e negativos apropriados, incluindo lisados celulares de KO, se disponíveis, para confirmar a especificidade.
• Em imunofluorescência e IHC, espera-se coloração nuclear; no entanto, as condições de permeabilização e fixação podem precisar de otimização devido à localização do antígeno.
• A expressão de SIRT1 é onipresente, mas os níveis podem variar; considere usar controles de carga e validar o anticorpo no seu tipo de tecido/célula de interesse antes de ensaios quantitativos.
• Este anticorpo está listado para citometria de fluxo (intracelular); garanta a permeabilização adequada e inclua um controle de isotipo.

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