[Validado por KO] Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Smad3 para WB, IHC-P, IP, ChIP, ELISA - P84022

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Smad3

• O membro 3 da família SMAD (SMAD3), também conhecido como homólogo 3 Mothers against decapentaplegic (MADH3) ou hMAD-3, é codificado pelo gene SMAD3 e funciona como um SMAD regulado por receptor (R-SMAD) na via de sinalização TGF-beta.
• Atua como um transdutor de sinal intracelular e modulador transcricional: após ativação pelas quinases do receptor tipo 1 do TGF-beta ou ativina, forma um complexo com o SMAD4 e transloca para o núcleo para regular a transcrição de genes alvo.
• Liga-se ao elemento TRE nos promotores de genes responsivos ao TGF-beta e pode formar um complexo SMAD3/SMAD4/JUN/FOS em locais AP-1/SMAD para ajustar finamente a transcrição.
• Transita entre o citoplasma e o núcleo; predominantemente citoplasmático na ausência de ligante e acumula-se no núcleo após ativação da via (PMID: não disponível).
• Regula a condrogênese e osteogênese, inibe a cicatrização inicial de fraturas ósseas e modula a cicatrização de feridas afetando o crescimento/migração de queratinócitos e a quimiotaxia de monócitos de maneira sensível a hormônios.
• Sofre múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação, ADP-ribosilação e ubiquitinação, que controlam sua atividade, estabilidade e interações; também contém domínios de ligação ao zinco essenciais para a ligação ao DNA.
• Múltiplas isoformas são produzidas por splicing alternativo, contribuindo para a diversidade funcional.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 100-200 do Smad3 humano (NP_005893.1). Esta região é conservada, explicando a reatividade cruzada do anticorpo com o Smad3 de camundongo e rato.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda em aproximadamente 48 kDa. Inclua controles de carregamento adequados e marcadores de peso molecular para confirmar o tamanho da banda.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), as condições de recuperação de antígeno (por exemplo, recuperação de epítopo induzida por calor) podem exigir otimização com base no tipo de tecido e método de fixação.
• O anticorpo foi validado para imunoprecipitação de cromatina (ChIP); recomenda-se o uso de loci de controle positivos e negativos para ligação do Smad3 para garantir a especificidade.
• Também adequado para imunoprecipitação (IP) e ELISA. Os usuários finais devem titular o anticorpo para determinar a diluição ideal para seus sistemas experimentais específicos.

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