[KO Validado] Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-TRIM21/SS-A para WB e ELISA - P19474

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TRIM21

• TRIM21 (também conhecido como Ro52, SSA1, RNF81) é uma E3 ubiquitina-proteína ligase de 54 kDa e membro da família do motivo tripartido (TRIM), caracterizada pelos domínios RING finger, B-box e coiled-coil.
• Sua função como E3 ubiquitina ligase é dependente das enzimas E2 UBE2D1, UBE2D2, UBE2E1 e UBE2E2, formando um complexo com UBE2D2 que medeia a autoubiquitinação e a ubiquitinação de substratos como USP4 e IKBKB. Referências relacionadas: PMID:16297862, PMID:16316627, PMID:16472766, PMID:16880511, PMID:19675099
• TRIM21 é um componente dos complexos E3 ubiquitina-proteína ligase SCF (SKP1-CUL1-proteína F-box) baseados em cullina, como os complexos semelhantes a SCF(SKP2), que ubiquitinam CDKN1B fosforilado em Thr-187, promovendo sua degradação proteassomal e regulando a progressão do ciclo celular. Referências relacionadas: PMID:16880511
• Ele regula negativamente a sinalização imune inata direcionando IRF3 para degradação mediada por poliubiquitinação, reduzindo a produção de IFN-beta após o reconhecimento de patógenos, e também monoubiquitina IKBKB para inibir a sinalização de NF-kappa-B induzida por Tax. Referências relacionadas: PMID:18641315, PMID:19675099
• TRIM21 medeia a degradação proteassomal dependente de ubiquitina da cadeia pesada do IgG1 via a via de degradação associada ao RE (ERAD) e aumenta a atividade de decapagem do DCP2. Referências relacionadas: PMID:18022694, PMID:18361920
• Ele desempenha um papel fundamental na regulação da autofagia, servindo como plataforma para a montagem de ULK1, Beclin 1 e membros da família ATG8, e direciona FIP200/RB1CC1 para ubiquitinação para modular a autofagia. Referências relacionadas: PMID:26347139, PMID:36359729
• TRIM21 se localiza no citoplasma, núcleo, corpos P, grânulos de estresse e autofagossomos, e existe como uma partícula de ribonucleoproteína que se liga a pequenos RNAs HY, com isoformas tecido-específicas expressas no coração fetal e adulto e no pulmão fetal. Referências relacionadas: PMID:1985094, PMID:8666824
• Durante a infecção viral, ele promove a piroptose celular via ubiquitinação ligada a 'Lis-6' de ISG12a/IFI27, e regula positivamente a imunidade inata por meio da ubiquitinação ligada a 'Lis-27' de MAVS. Além disso, ele medeia a poliubiquitinação ligada a 'Lis-63' de G3BP1 em resposta ao choque térmico, levando à desmontagem dos grânulos de estresse. Referências relacionadas: PMID:36426955, PMID:29743353, PMID:36692217

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot, uma banda de aproximadamente 54 kDa é esperada; valide a especificidade da banda usando lisados de células com knockout ou knockdown.
• Otimize a diluição do anticorpo primário em WB e ELISA de acordo com as suas condições experimentais específicas, pois a concentração de trabalho ótima pode variar.
• Como o imunogênio corresponde aos aminoácidos 86-334, o anticorpo provavelmente reconhece uma região comum às isoformas 1 e 2, que são expressas nos tecidos do coração e pulmão.
• Ao usar amostras de rato, confirme a reatividade cruzada testando um painel de tecidos, pois a reatividade foi observada, mas pode precisar de verificação para o seu tecido alvo.

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