[KO Validado] Anticorpo Monoclonal Anti-TRIM25 de Coelho para WB, ELISA - Q14258

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TRIM25

• TRIM25, também conhecido como EFP, RNF147 ou ZNF147, é uma ligase E3 ubiquitina/ISG15 pertencente à família de proteínas do motivo tripartido (TRIM). Referências relacionadas: PMID:16352599
• Atua como mediador crítico da imunidade antiviral inata ao catalisar a poliquitinação ligada a Lys-63 dos sensores de RNA viral RIG-I e IFIH1, levando à produção de interferão. Referências relacionadas: PMID:17392790, PMID:29357390, PMID:30193849, PMID:23950712
• Além disso, o TRIM25 regula diversos substratos, incluindo 14-3-3 sigma (SFN) via ISGilação, ZFHX3 via degradação proteassômica e o fator antiviral ZAP/ZC3HAV1 via ubiquitinação para aumentar a ligação ao mRNA. Referências relacionadas: PMID:16352599, PMID:17069755, PMID:22452784, PMID:28060952, PMID:28202764
• No núcleo, o TRIM25 promove o reinício de forks de replicação de DNA parados ao ubiquitinar a helicase BLM, mediado pelo suporte KHDC3L-OOEP.
• TRIM25 suprime a autofagia ao ubiquitinar e degradar o receptor de carga p62/SQSTM1. Referências relacionadas: PMID:40542578
• A proteína localiza-se predominantemente no citoplasma, mas também se acumula em grânulos de estresse e no núcleo.
• TRIM25 é expresso de forma ubíqua, com níveis proteicos elevados detectados em tumores de mama.
• Ele sofre acetilação e fosforilação e contém domínios característicos RING, B-box e coil-coil.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 100–200 do TRIM25 humano. Espera-se que esta região esteja acessível e possa proporcionar um bom reconhecimento do epítopo; no entanto, valide o anticorpo no seu tipo de amostra específico.
• Este anticorpo é validado para aplicações de Western blot (WB) e ELISA. Para WB, considere utilizar lisados de controlo positivo de linhas celulares humanas ou tecidos que expressem TRIM25. Devido à validação KO, ele provavelmente apresenta alta especificidade; confirme a eficiência de silenciamento no seu sistema.
• Dado o envolvimento do TRIM25 na imunidade inata, o tratamento de células com mímicos virais (por exemplo, poly(I:C)) ou interferões pode modular os níveis de expressão, o que pode ser avaliado por este anticorpo.
• Para ELISA, considere utilizar a proteína recombinante TRIM25 ou lisados celulares como antígeno de revestimento. Otimize a diluição do anticorpo com base nas condições específicas do ensaio.

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