Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-VRK1 Validado por KO para WB, IHC-P, ELISA - Q99986

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da VRK1

• Identidade da proteína: VRK1 (Vaccinia-related kinase 1) é uma quinase serina/treonina amplamente expressa, codificada pelo gene VRK1 (Gene ID: 7443) em humanos. Pertence à família de quinases VRK e contém domínios catalíticos e regulatórios conservados.
• Regulação da cromatina: A VRK1 controla a organização da cromatina fosforilando a histona H3 na Thr-4 e a histona H2AX, um processo crítico para a condensação nuclear, progressão mitótica e expressão gênica. Referências relacionadas: PMID:31527692 PMID:37179361
• Resposta a danos no DNA: Em resposta a lesões no DNA, a VRK1 fosforila a KAT5, aumentando sua atividade acetiltransferase de histonas e associação à cromatina, e também modifica a TP53BP1 para orquestrar a sinalização de reparo. Referências relacionadas: PMID:33076429 PMID:31527692
• Fosforilação de substratos e controle transcricional: A VRK1 fosforila a p53 na Thr-18, interrompendo sua interação com a MDM2 e estabilizando a p53, enquanto também ativa a ATF2 e a JUN para modular a transcrição gênica. Referências relacionadas: PMID:10951572 PMID:15105425 PMID:31527692
• Montagem do corpúsculo de Cajal: A VRK1 localiza-se nos corpúsculos de Cajal e fosforila a coilina, uma etapa essencial para a integridade e função do corpúsculo de Cajal no processamento de RNA. Referências relacionadas: PMID:21920476 PMID:31090908
• Desmontagem do Golgi: Durante a mitose, a fosforilação da VRK1 mediada pela PLK3 desencadeia a fragmentação do Golgi, facilitando a partição igualitária do organelo nas células filhas. Referências relacionadas: PMID:19103756
• Expressão tecidual e ligações com doenças: Altamente expressa no fígado fetal, testículo e timo, mutações na VRK1 estão ligadas a distúrbios neurodegenerativos e neuropatias periféricas, destacando seu papel na manutenção neuronal.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Desenho do imunógeno: O anticorpo foi gerado contra um fragmento recombinante (aa 257-396) localizado na região C-terminal da VRK1 humana. Esta região apresenta conservação moderada entre espécies; verifique a homologia de sequência se usar com amostras não humanas.
• Western blotting: Espere uma banda específica em aproximadamente 45 kDa. Para maior confiança, inclua um lisado de células knockout (KO) como controle negativo e um controle positivo expressando VRK1.
• Considerações para IHC-P: Métodos padrão de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão citrato, pH 6.0) são tipicamente adequados. Otimize a diluição do anticorpo e inclua secções de tecido com expressão conhecida de VRK1 (por exemplo, testículo, timo) como controles positivos.
• Otimização de ELISA: Utilize proteína ou peptídeo recombinante de VRK1 como antígeno de revestimento. Titular o anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal e validar com reagentes de bloqueio e detecção apropriados.

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