[KO Validado] Anti-HK1 Coelho pAb para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P19367

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Hexoquinase-1 (HK1)

• A HK1 (Hexoquinase-1) é uma enzima de ~102 kDa que catalisa a fosforilação de hexoses, principalmente D-glucose a glucose-6-fosfato, o primeiro e limitante passo da glicólise (PubMed:1637300, PubMed:25316723, PubMed:27374331). Referências relacionadas: PMID:1637300 PMID:25316723 PMID:27374331
• A enzima também fosforila outras hexoses como D-glucosamina, D-frutose, D-manose e 2-desoxi-D-glucose, mas não N-acetil-D-glucosamina (PubMed:27374331). Referências relacionadas: PMID:27374331
• Além da glicólise, a HK1 funciona como um recetor de reconhecimento de padrões para peptidoglicano bacteriano, ligando o metabolismo da glucose à ativação imune inata. Quando a N-acetil-D-glucosamina bacteriana é libertada no citosol, inibe a HK1 e promove a sua dissociação da membrana externa mitocondrial, desencadeando a ativação do inflamassoma NLRP3 (PubMed:27374331). Referências relacionadas: PMID:27374331
• A HK1 localiza-se predominantemente na membrana externa mitocondrial, mas também é encontrada no citosol, onde as suas funções metabólicas e imunes são compartimentalizadas.
• Existem múltiplos isoformas específicos de tecido: o isoforma 2 é específico de eritrócitos, enquanto os isoformas 3 e 4 são específicos dos testículos (PubMed:10978502). Referências relacionadas: PMID:10978502
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, que podem regular a atividade enzimática e a localização subcelular.
• Variantes genéticas na HK1 estão associadas a doenças como a doença de Charcot-Marie-Tooth, anemia hemolítica hereditária, deficiência intelectual, neurodegeneração, neuropatia e retinite pigmentosa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot, espere uma banda a ~102 kDa. Considere usar condições redutoras e tempo de transferência suficiente devido ao grande tamanho da proteína.
• O imunogénio corresponde à região N-terminal (aa 21–219), que é conservada entre humano, rato e rato, suportando ampla reatividade cruzada entre espécies.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), note que a HK1 é predominantemente mitocondrial; padrões de coloração mitocondrial devem ser esperados. Recuperação de antigénio e permeabilização podem ser necessárias.
• Para imunoprecipitação (IP), valide a ligação do anticorpo em condições nativas e inclua controlos de isotipo apropriados.
• O anticorpo foi validado por knockout; no entanto, inclua sempre controlos positivos e negativos no seu sistema experimental para confirmar a especificidade.

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