[Validado por KO] Anticorpo Monoclonal de Coelho anti-NRF2 - Q16236

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NRF2

• O NRF2 é um fator de transcrição que se liga a elementos de resposta antioxidante (ARE) nos promotores de genes citoprotetores, como as enzimas de desintoxicação de fase 2, e promove a sua expressão para neutralizar eletrófilos reativos. Referências relacionadas: PMID:11035812, PMID:19489739, PMID:29018201
• Em condições basais, o NRF2 é ubiquitinado e degradado no citoplasma pelo complexo KEAP1; sob stress oxidativo, metabolitos eletrófilos inibem o KEAP1, permitindo a acumulação nuclear do NRF2, a heterodimerização com pequenas proteínas Maf e a ativação génica mediada por ARE. Referências relacionadas: PMID:11035812, PMID:15601839, PMID:19489739, PMID:29018201, PMID:29590092
• A via do NRF2 é também ativada pela autofagia seletiva (via interação KEAP1‑SQSTM1/p62) e pela resposta a proteínas mal enoveladas, contribuindo para a homeostasia redox e a sobrevivência celular após stress do retículo endoplasmático. Referências relacionadas: PMID:20452972
• O NRF2 pode estar envolvido na ativação transcricional do cluster génico da β‑globina ao mediar a atividade de enhancer do sítio hipersensível 2 da região de controlo do locus da β‑globina. Referências relacionadas: PMID:7937919
• O NRF2 é um regulador crítico da resposta imunitária inata: suprime a transcrição de citocinas inflamatórias em macrófagos, reprime a deteção citosólica de DNA antiviral ao regular negativamente o STING1 e limita a libertação de citocinas pró‑inflamatórias durante a infeção por SARS‑CoV‑2, ao mesmo tempo que inibe a replicação de diversos vírus patogénicos através de um mecanismo independente de interferão. Referências relacionadas: PMID:30158636, PMID:33009401
• A localização subcelular é predominantemente citoplasmática em condições sem stress, com translocação nuclear sob stress oxidativo ou eletrófilo; é amplamente expresso, com níveis mais elevados no músculo adulto, rim, pulmão, fígado e músculo fetal.
• As modificações pós‑traducionais incluem acetilação, glicação, fosforilação e ubiquitinação, que modulam a sua estabilidade, atividade e interações.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 243‑400 do NRF2 humano, uma região que inclui o domínio de ligação ao DNA e parte do domínio Neh1; considere isto ao conceber ensaios específicos de epítopo.
• Para Western blot, detete uma banda a aproximadamente 68 kDa; valide o sinal utilizando lisados de células knockout, se disponíveis, para confirmar a especificidade.
• Para aplicações de ChIP, otimize as condições de cross‑linking e sonicação para o seu tipo celular e inclua regiões de controlo positivo/negativo adequadas.
• Em ELISA, emparelhe este anticorpo com um anticorpo de deteção adequado após confirmar a reatividade com o formato do seu antigénio-alvo.
• Embora validado para humano, camundongo e rato, verifique a reatividade na sua espécie experimental e tipo de tecido específicos antes de escalar.

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