[Validado por KO] RAG2 pAb de Coelho para WB, ELISA - P55895

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RAG2

• Componente central do complexo RAG, um complexo multiproteico que medeia a fase de clivagem do DNA durante a recombinação V(D)J, montando um repertório diverso de genes de imunoglobulinas e receptores de células T em linfócitos B e T em desenvolvimento.
• O RAG2 é necessário para todas as atividades catalíticas conhecidas mediadas pelo RAG1 dentro do complexo RAG, provavelmente atuando como um sensor do estado da cromatina que recruta o complexo para a histona H3 trimetilada na Lys-4 (H3K4me3).
• A recombinação V(D)J envolve um mecanismo de clivagem de DNA em duas etapas: nick inicial a montante do heptâmero, seguido por uma reação de transesterificação direta gerando extremidades codificantes em forma de alfinete e extremidades de sinal cegas 5'-fosforiladas.
• O complexo RAG também desempenha um papel na exclusão alélica de células pré-B, impondo a clonalidade e a expressão monoespecífica do receptor de antígeno de células B por reposicionar o segundo alelo de imunoglobulina para a heterocromatina pericentromérica.
• Localiza-se exclusivamente no núcleo, consistente com o seu papel na recombinação de DNA e interação com a cromatina.
• Expresso especificamente em células das linhagens de linfócitos B e T.
• Contém domínios de dedo de zinco e liga íons metálicos; classificado como um regulador da cromatina envolvido na recombinação de DNA e associado à imunodeficiência combinada grave (SCID).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde aos aminoácidos 351-527 do RAG2 humano; esta região pode conferir reatividade entre espécies, mas deve ser validada na sua amostra alvo, especialmente se utilizar sistemas não humanos/camundongos.
• Para o Western blotting, considere usar extratos nucleares de linhas de células B ou T (por exemplo, Jurkat, Raji) como controlos positivos, com um peso molecular previsto de aproximadamente 59 kDa.
• As aplicações de ELISA podem exigir otimização do antigénio de revestimento e das condições de deteção; a natureza policlonal do anticorpo pode fornecer um sinal robusto, mas também pode apresentar ruído de fundo em amostras complexas.
• Dado que a expressão do RAG2 está restrita a linfócitos em desenvolvimento, certifique-se de que o seu sistema experimental contém as populações celulares apropriadas; células induzidas ou primárias podem requerer manuseamento cuidadoso.

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