[KO Validado] Anticorpo Monoclonal de Coelho TRIM21/SS-A para WB, ELISA - P19474

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de TRIM21/SS-A

• TRIM21, também conhecido como SS-A/Ro52, é um autoantigénio ribonucleoproteico de 52 kDa que existe como uma partícula de ribonucleoproteína composta por um único polipéptido e pequenas moléculas de RNA; pelo menos dois isoformas estão presentes em vários tecidos, com diferenças específicas de tecido identificadas. Referências relacionadas: PMID:1985094 PMID:8666824

• TRIM21 funciona como uma ligase E3 de ubiquitina-proteína, dependente das enzimas E2 UBE2D1, UBE2D2, UBE2E1 e UBE2E2, e catalisa tanto a auto-ubiquitinação quanto a ubiquitinação de substratos como USP4 e IKBKB. Referências relacionadas: PMID:16297862 PMID:16316627 PMID:16472766 PMID:16880511 PMID:19675099

• Componente do complexo de ligase de ubiquitina semelhante a SCF(SKP2), o TRIM21 medeia a ubiquitinação e degradação proteassomal de CDKN1B, desempenhando assim um papel na regulação do ciclo celular. Referências relacionadas: PMID:16880511

• TRIM21 regula negativamente a sinalização imune inata ao mediar a degradação dependente de poliubiquitina de IRF3 e a monoubiquitinação de IKBKB, o que suprime a produção de IFN-beta e a ativação de NF-kappa-B, respetivamente. Referências relacionadas: PMID:18641315 PMID:19675099

• Em respostas antivirais, o TRIM21 promove a piroptose celular via ubiquitinação ligada a 'Lys-6' de ISG12a, facilita a ubiquitinação de MAVS levando ao recrutamento de TBK1, e aumenta a transcrição de genes de citocinas através da ubiquitinação de IRF8. Referências relacionadas: PMID:36426955 PMID:29743353

• TRIM21 organiza a maquinaria autofágica ao montar membros da família ULK1, BECN1 e ATG8, e regula a autofagia via ubiquitinação de FIP200; também medeia a desmontagem de grânulos de stress através da poliubiquitinação ligada a 'Lys-63' de G3BP1 após choque térmico. Referências relacionadas: PMID:26347139 PMID:36359729 PMID:36692217

• Subcelularmente, o TRIM21 localiza-se no citoplasma, vesículas citoplasmáticas, autofagossomas, núcleo, P-bodies e grânulos de stress.

• O isoforma 1 e o isoforma 2 do TRIM21 são expressos no coração fetal e adulto e no pulmão fetal.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, comece com uma faixa de diluição padrão (por exemplo, 1:500-1:2000) em lisados de células humanas que expressam TRIM21; a validação por knockout garante especificidade, mas as condições ideais devem ser determinadas empiricamente.
• No ELISA, use o anticorpo como reagente de captura ou deteção; note que o imunogénio é um péptido sintético da região 251-350, portanto confirme que o epítopo está acessível no seu formato de ensaio.
• Relata-se que o anticorpo reage de forma cruzada com TRIM21 humano; a reatividade cruzada com outras espécies ou isoformas deve ser verificada no seu sistema experimental.
• Dada a envolvência do TRIM21 na autofagia e respostas ao stress, considere usar controlos e estímulos apropriados (por exemplo, IFN-gama, choque térmico) para avaliar mudanças de expressão.

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