Anticorpo Policlonico de Coelho XIAP Validado por KO para WB, ELISA - P98170

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do XIAP

• XIAP é uma proteína multifuncional que inibe diretamente a apoptose ao se ligar e bloquear os sítios ativos das caspases-3 e -7, e ao manter a caspase-9 em um estado monomérico inativo.
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• Como ligase E3 ubiquitina-proteína, XIAP catalisa a poliubiquitinação ligada a Lys-63 de RIPK2 a jusante de NOD1/2, criando um scaffold para a ativação de NF-κB e quinase MAP, e também ubiquitina RIPK1, MAP3K2 e outros mediadores de sinalização para ajustar vias inflamatórias e de sobrevivência.
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• XIAP participa da homeostase do cobre ao ubiquitinar COMMD1 para degradação proteassomal e aumentar a atividade da chaperona CCS em relação a SOD1, regulando assim o metabolismo celular do cobre.
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• Regula positivamente a sinalização Wnt ao ubiquitinar os correpresores transcricionais TLE, levando à sua dissociação de TCF/LEF e permitindo programas transcricionais direcionados pela β-catenina.
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• XIAP suprime a formação de ripoptossomos e a morte celular dependente de caspase-8 ao ubiquitinar RIPK1 e caspase-8.
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• A proteína se localiza tanto no citoplasma quanto no núcleo.

• Expressa ubiquitinamente, exceto em leucócitos do sangue periférico; detectada em nível proteico nas criptas colônicas.
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• XIAP pertence à família dos inibidores de apoptose (IAP) e contém três domínios BIR e um domínio RING finger C-terminal; está sujeito a fosforilação regulatória, S-nitrosilação e modificações ubiquitina-like.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (resíduos 198‑497) cobre os domínios BIR2, BIR3 e parte do domínio RING, que são altamente conservados entre humano, camundongo e rato, o que suporta a reatividade cruzada observada. Considere verificar a reatividade cruzada em seu sistema de modelo específico incluindo controles apropriados.
• Para Western blot, uma banda de aproximadamente 57 kDa é esperada; otimize o bloqueio e a diluição do anticorpo usando um lisado de uma linha celular com expressão confirmada de XIAP (ex: HeLa ou Jurkat). Devido à validação por KO, este anticorpo pode oferecer alta especificidade; não obstante, valide em sua própria configuração experimental.
• Embora o anticorpo esteja listado para ELISA, o desempenho pode depender da apresentação do antígeno; considere usar a proteína XIAP recombinante ou lisados celulares como antígeno de revestimento e valide as condições do ensaio.
• XIAP atua em múltiplas vias de sinalização (NF‑κB, Wnt, apoptose); ao estudar seu papel, use estímulos apropriados (ex: TNFα, ligantes de NOD1/2) e inibidores para analisar efeitos específicos de via.

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