[KO Validado] YTHDF2 Rabbit mAb - Q9Y5A9

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de YTHDF2

• YTHDF2 é uma proteína leitora de m6A que se liga especificamente a RNAs modificados com N6-metiladenosina (m6A) para regular sua estabilidade e processamento. Referências relacionadas: PMID:24284625, PMID:26046440, PMID:26318451
• Promove a degradação de mRNAs que contêm m6A ao recrutar o complexo deadenilase CCR4-NOT por meio de interação direta com CNOT1. Referências relacionadas: PMID:27558897
• Em cooperação com RIDA/HRSP12, direciona transcritos com um sítio de ligação específico (5'-GGUUC-3') para clivagem endorribonucleolítica pelo complexo ribonuclease P/MRP. Referências relacionadas: PMID:30930054
• Ao se ligar a mRNAs polimetilados, YTHDF2 sofre separação de fase líquido-líquido, induzindo a formação de compartimentos sem membrana, como corpos P e grânulos de estresse. Referências relacionadas: PMID:31292544, PMID:31388144, PMID:31642031
• Localiza-se principalmente no citosol, nos corpos P e nos grânulos de estresse; sob choque térmico, ele se relocaliza para o núcleo para proteger as marcas de m6A e promover a tradução independente de capa. Referências relacionadas: PMID:26458103
• É essencial para a maturação de oócitos e espermatogênese ao controlar a degradação do mRNA materno (Por similaridade).
• Regula a especificação de células-tronco hematopoiéticas e inibe a diferenciação neural de iPSCs ao promover a degradação de transcritos alvo modificados com m6A. Referências relacionadas: PMID:30065315, PMID:32169943
• Inibe a resposta do interferon tipo I ao se ligar e degradar transcritos de IFNB que contêm m6A. Referências relacionadas: PMID:30559377
• Regula o metabolismo circadiano lipídico hepático ao promover a degradação dependente de m6A dos transcritos de PPARA. Referências relacionadas: PMID:30428350
• É altamente expresso em células-tronco pluripotentes induzidas (iPSCs) e é regulado negativamente durante a diferenciação neural.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para WB, uma diluição inicial de 1:1000 costuma ser eficaz; no entanto, recomenda-se a otimização. Valide a especificidade usando linhas celulares com knockout ou silenciamento por siRNA.
• Para IHC-P, realize a recuperação de antígeno induzida por calor e considere uma faixa de diluição de 1:50 a 1:200.
• Para IP, podem ser testadas quantidades típicas de anticorpo de 1 a 2 µg por 500 µg de proteína total.
• Para ELISA, sugere-se a cobertura com o peptídeo imunógeno ou YTHDF2 recombinante.
• Dada a função de ligação a m6A, considere a possível competição com RNA metilado endógeno em IP e outros ensaios associados a RNA.

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