Anticorpo Policlonal de Coelho KPNB1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14974

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do KPNB1

• A subunidade beta-1 da importina (KPNB1), também conhecida como carioferina beta-1 ou importina-90, funciona como um recetor de transporte nuclear, mediando a importação de proteínas em associação com um adaptador importina-alfa ou de forma autónoma, reconhecendo diretamente sinais de localização nuclear (NLS). Referências relacionadas: PMID:10228156, PMID:11682607, PMID:11891849

• O complexo importina/substrato acopla-se ao complexo de poro nuclear (NPC) através da ligação do KPNB1 a repetições FxFG de nucleoporinas, seguido por uma translocação dependente de energia e conduzida por Ran através do envelope nuclear. Referências relacionadas: PMID:10228156, PMID:11682607, PMID:11891849

• No lado nucleoplasmático, a ligação de RanGTP dissocia o complexo, libertando a carga; as subunidades de importina são subsequentemente recicladas para o citoplasma para ciclos de transporte subsequentes. Referências relacionadas: PMID:10228156, PMID:11682607, PMID:11891849

• O KPNB1 importa de forma autónoma as proteínas ribossomais RPL23A, RPS7 e RPL5, e coopera com a IPO7 para importar a histona H1; também pode medir a importação nuclear das histonas centrais H2A, H2B, H3 e H4 in vitro. Referências relacionadas: PMID:11682607, PMID:9687515, PMID:10228156

• Cargas adicionais incluem reguladores de transcrição como MRTFA, SNAI1 e PRKCI, destacando o seu papel amplo no transporte nuclear dependente de sinal. Referências relacionadas: PMID:11891849, PMID:19386897, PMID:20818336

• Durante a infeção por HIV-1, o KPNB1 liga-se e medeia a importação nuclear da proteína viral Rev, facilitando a replicação viral.

• A proteína localiza-se predominantemente no citoplasma e no envelope nuclear, consistente com a sua função na interface nucleocitoplasmática.

• O KPNB1 sofre modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e ADP-ribosilação, e o splicing alternativo produz múltiplas isoformas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot (WB), espere uma banda perto de 97 kDa; inclua controlos positivos apropriados (por exemplo, lisados de HeLa, HEK293) e considere usar um controlo de carga para normalização.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), teste métodos de recuperação de antigénio (por exemplo, tampão citrato, Tris-EDTA) e titule a diluição do anticorpo para minimizar o fundo; é antecipado um padrão de coloração nuclear/citoplasmática.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), otimize as condições de fixação (por exemplo, 4% PFA) e permeabilização (por exemplo, 0,1% Triton X-100) e use um anticorpo secundário adequado para detetar o primário de coelho.
• As aplicações de ELISA podem ser realizadas com revestimento indireto do peptídeo imunogénio ou da proteína recombinante KPNB1; valide as condições do ensaio com amostras positivas e negativas conhecidas.
• Por se tratar de um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser confirmada ao alterar lotes em estudos de longo prazo.

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