Anticorpo Monoclonal de Coelho KRAS+HRAS+NRAS para WB, IF/ICC, ELISA - P01111 / P01112 / P01116

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Pan-Ras (KRAS/HRAS/NRAS)

• A proteína NRas é uma pequena GTPase que funciona como um interruptor molecular na via de sinalização Ras-MAPK, controlando a proliferação e sobrevivência celular através do ciclo GDP/GTP e da atividade GTPase intrínseca (PubMed:30712867). Referências relacionadas: PMID:30712867

• KRAS, HRAS e NRAS são membros da família clássica Ras, compartilhando alta homologia de sequência; eles regulam diversos processos celulares a jusante dos receptores de fatores de crescimento, mas cada isoforma pode exibir funções distintas e expressão tecido-específica.

• Subcelularmente, o NRas localiza-se na membrana celular e na membrada do aparelho de Golgi, onde transmite sinais extracelulares para efetores intracelulares.

• Modificações pós-traducionais, incluindo farnesilação, palmitoilação e ubiquitinação, controlam dinamicamente o tráfego e a estabilidade do NRas; por exemplo, a ubiquitinação mediada por LZTR1 marca o NRas para degradação proteassomal (PubMed:40934300). Referências relacionadas: PMID:40934300

• Mutações em NRAS, KRAS e HRAS que travam as proteínas no estado ligado a GTP são eventos oncogênicos potentes, tornando os anticorpos pan-Ras ferramentas valiosas para pesquisa em câncer e desenvolvimento de diagnósticos.

• O anticorpo foi produzido contra uma região N-terminal conservada (aa 1-100) do NRAS humano, que é altamente idêntica entre as três isoformas, permitindo detecção de amplo espectro.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Com base no desenho do imunógeno direcionado ao N-terminal conservado do NRAS (aa 1-100), espera-se que o anticorpo detecte KRAS, HRAS e NRAS; no entanto, a reatividade isoforma-específica deve ser validada usando proteínas recombinantes ou linhagens celulares knockout.
• Para WB, observa-se uma banda em aproximadamente 18kDa sob condições redutoras; use controles de carga apropriados e confirme a especificidade com knockdown por siRNA ou superexpressão.
• Em IF/ICC, considere fixar as células com PFA a 4% e permeabilizar com Triton X-100; otimize a concentração do anticorpo para minimizar o fundo, pois alvos localizados na membrana podem exigir permeabilização suave.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser emparelhado com reagentes de detecção apropriados; garanta que o recobrimento da placa capture o antígeno em sua conformação nativa para quantificação precisa.
• Como a sinalização Ras é rigidamente regulada, inclua controles para modificações pós-traducionais (por exemplo, inibidores de farnesilação) se estiver investigando a translocação para a membrana.

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