Anticorpo Policlonal de Coelho para Histona H3 Lactilada (K14) para WB/ELISA (Q16695/P68431)

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

A Histona H3 é um componente central do nucleossomo, essencial para o empacotamento do DNA em cromatina e para regular a acessibilidade do DNA durante a transcrição, reparo, replicação e estabilidade cromossômica. Ela forma o octâmero de histonas junto com H2A, H2B e H4. Referências relacionadas: UniProt Q16695 | UniProt P68431

Duas isoformas principais representadas pelos acessos SWISS são a Histona H3.1t (Q16695), que é expressa especificamente em células testiculares, e a Histona H3.1 canônica (P68431), codificada por múltiplos genes e amplamente expressa. Ambas compartilham alta homologia de sequência, incluindo o resíduo de lisina 14 que é o alvo deste anticorpo.

A Histona H3 sofre uma extensa gama de modificações pós-traducionais (PTMs) que constituem o código de histonas, influenciando a expressão gênica e a dinâmica da cromatina. Essas PTMs incluem acetilação, metilação, fosforilação, citrulinização e lactilação. A lactilação em resíduos de lisina foi identificada em múltiplas posições na histona H3 (por exemplo, K10, K19, K24, K28, K57, K80), conforme relatado em estudos recentes. Referências relacionadas: PMID:31645732

A localização subcelular da Histona H3 é predominantemente nuclear, onde se associa aos cromossomos durante todo o ciclo celular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é um peptídeo lactilado sintético em torno de K14 da Histona H3 humana. Para confirmar a especificidade do anticorpo, considere usar um peptídeo não lactilado (controle) ou realizar ensaios de competição com peptídeo.
• Para Western blot (WB), a Histona H3 tem um peso molecular previsto de aproximadamente 15 kDa, mas o preparo da amostra e as condições de separação (por exemplo, extração ácida ou extratos nucleares de alto sal) podem afetar a detecção. Valide o ensaio no sistema celular ou tecidual relevante.
• Para ELISA, certifique-se de que o antígeno lactilado seja apresentado adequadamente. Os formatos ELISA direto ou sanduíche podem ser otimizados usando peptídeo ou proteína recombinante.
• Embora o anticorpo seja previsto para reagir com uma ampla gama de espécies (Humano, Rato, Rato e outras) devido à conservação da sequência ao redor do sítio de modificação, a reatividade cruzada deve ser confirmada experimentalmente para cada nova espécie ou tipo de amostra.
• Como a lactilação da histona é uma PTM dinâmica, considere incluir estímulos metabólicos apropriados ou condições ambientais para enriquecer a modificação antes da análise.

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