Anticorpo Monoclonal de Coelho contra Histona H3-K18 Lactilada (Q16695/P68431) para Pesquisa Epigenética

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3 (Lactilada K18)

• A histona H3 é um componente central do nucleossomo, enrolando e compactando o DNA em cromatina para regular a acessibilidade do DNA para transcrição, reparo, replicação e estabilidade cromossômica.
• A proteína se localiza no núcleo e nos cromossomos, com padrões de expressão específicos de tecidos: a isoforma H3.1t (Q16695) é predominantemente expressa em células testiculares, enquanto as isoformas H3.1 (P68431) são amplamente expressas.
• A histona H3 sofre extensas modificações pós-traducionais (PTMs), incluindo acetilação, metilação, fosforilação e lactoilación, conhecidas coletivamente como código de histonas, que modula a dinâmica da cromatina e a expressão gênica.
• A lactoilación de resíduos de lisina de histonas, como na K18, surgiu como uma modificação importante que liga o metabolismo celular à regulação epigenética. Este anticorpo monoclonal de coelho reconhece especificamente a lisina 18 modificada por ácido lático na histona H3.
• A lactoilación no resíduo adjacente K19 foi documentada (PMID: 31645732), destacando a possível importância funcional desta região.

Referências relacionadas:
UniProt Q16695
UniProt P68431
PMID:31645732

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot, considere usar um gel SDS-PAGE de baixa porcentagem (ex: 10-12%) para resolver a proteína de histona H3 de ~15 kDa e otimizar a diluição do anticorpo com base no nível de expressão da forma lactilada em sua amostra.
• Empregue controles negativos apropriados, como um competidor de peptídeo não modificado ou lisados de células não tratadas com baixa lactilação, para confirmar a especificidade.
• Em ELISA, revija com o peptídeo lactilado e valide contra um controle não lactilado para avaliar a reatividade cruzada.
• Como a lactoilación pode ser induzida em condições metabólicas específicas (ex: alto lactato), considere tratar as células com estímulos relevantes e validar no sistema de amostra relevante.
• Observe que o anticorpo tem reatividade cruzada ampla prevista (humano, camundongo, rato e outros), mas a validação na espécie desejada é recomendada.

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