Anticorpo policlonal de coelho anti-LC3B para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9GZQ8

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da LC3B

• LC3B (cadeia leve 3 beta da proteína 1 associada aos microtúbulos), também conhecida como ATG8F ou MAP1LC3B, é um componente central da via de autofagia e pertence à família de proteínas semelhantes à ubiquitina ATG8.
• Ela funciona como um modificador semelhante à ubiquitina, essencial para o alongamento das membranas do fagóforo durante a formação do autofagossomo. Referências relacionadas: PMID:20418806, PMID:23209295, PMID:28017329
• A LC3B desempenha um papel fundamental em subtipos de autofagia seletiva, como a mitofagia, nos quais ancora os autofagolisossomos às membranas mitocondriais externas por meio da ligação à ceramida C-18 após a fissão mitocondrial. Referências relacionadas: PMID:22922758
• Ela promove a ciliogênese primária ao mediar a remoção autofágica de OFD1 dos satélites centriolares. Referências relacionadas: PMID:24089205
• Durante o estresse nutricional, a LC3B interage com o receptor de reticulofagia TEX264 para remodelar subdomínios do RE em autofagossomos, facilitando a renovação do RE. Referências relacionadas: PMID:31006537, PMID:31006538
• A LC3B recruta diretamente o fator de nucleação de actina JMY para as membranas do fagóforo, estimulando a polimerização da actina e a biogênese dos autofagossomos. Referências relacionadas: PMID:30420355
• Subcelularmente, a LC3B é encontrada nas membranas dos autofagossomos, nas vesículas citoplasmáticas, nas membranas mitocondriais e no citoesqueleto; ela sofre uma mudança característica de lipidização, passando da LC3B-I citosólica para a LC3B-II ligada à membrana.
• A expressão tecidual é mais elevada no coração, cérebro, músculo esquelético e testículos, com níveis mais baixos no fígado.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 1-100 da LC3B humana) está localizado na região N-terminal; considere confirmar a especificidade do anticorpo usando modelos com knockout ou knockdown de LC3B.
• Na técnica de Western blot, a LC3B normalmente aparece como duas bandas: uma LC3B-I citosólica de aproximadamente 15 kDa e uma LC3B-II de migração mais rápida, com aproximadamente 14 kDa (forma lipidada), sob condições redutoras; ambas as formas devem ser consideradas ao analisar o fluxo autofágico.
• Em aplicações de imunofluorescência, os protocolos de fixação e permeabilização podem precisar de otimização para revelar a marcação pontilhada de autofagossomos em condições indutoras de autofagia (por exemplo, privação de nutrientes ou tratamento farmacológico).
• Para ELISA, assegure-se de usar o tampão de revestimento e a diluição do anticorpo adequados; valide o ensaio com marcadores de autofagia conhecidos no sistema de amostra relevante.

CamelBio: sua ponte completa para o fornecimento

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