Anticorpo Policlonal de Coelho MAD1/MAD1L1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y6D9

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MAD1

• O MAD1L1 codifica a proteína do ponto de verificação de montagem do fuso mitótico MAD1, também conhecida como proteína 1 semelhante a deficiente em prisão mitótica, HsMAD1, hMAD1 e proteína de ligação ao Tax 181.
• O MAD1 é um componente central do ponto de verificação de montagem do fuso (SAC), que impede o início da anáfase até que todos os cromossomos estejam corretamente ligados aos microtúbulos do fuso na placa metafásica. Referências relacionadas: PMID:10049595, PMID:20133940, PMID:29162720
• Nos cinetocoros não ligados, o MAD1 forma um complexo heterotetrâmrico com MAD2L1 em conformação fechada (C-MAD2) e catalisa a conversão conformacional do MAD2L1 aberto (O-MAD2) para C-MAD2, uma etapa chave na geração do sinal difusível de "espera-anáfase". Referências relacionadas: PMID:10049595, PMID:20133940, PMID:29162720
• No citoplasma, o MAD1 pode sequestrar o MAD2L1, prejudicando a função do SAC e contribuindo para a instabilidade cromossômica em carcinomas hepatocelulares.
• A localização subcelular inclui o núcleo, cinetocoros, centrossomos, polos do fuso e citoplasma, refletindo seu papel dinâmico durante a mitose.
• Especificidade tecidual: O MAD1 é expresso em carcinomas hepatocelulares e linhagens celulares de hepatoma em nível proteico.
• Modificações pós-traducionais: O MAD1 sofre fosforilação, acetilação e conjugação tipo ubiquitina, que podem regular sua estabilidade e atividade.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região central (aa 360–700) do MAD1L1 humano, o que pode permitir o reconhecimento tanto da proteína completa quanto de possíveis produtos de clivagem; considere isso ao analisar padrões de bandas no WB.
• Para WB, o peso molecular previsto é de ~83 kDa; use controles positivos apropriados, como lisados de células HeLa ou outras linhagens de células em divisão ativa, para confirmar a especificidade.
• Para IF/ICC, é necessária a permeabilização para acessar o MAD1 localizado no núcleo e nos cinetocoros; valide a coloração no sistema de amostra relevante sob condições de prisão mitótica (por exemplo, tratamento com nocodazol).
• O desempenho no ELISA pode depender do tampão de revestimento e da apresentação do antígeno; considere protocolos padrão de ELISA indireto com a proteína recombinante MAD1 como referência.

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