MADCAM1 pAb de Coelho para WB, IHC-P, ELISA - Q13477

Especificações Principais e Parâmetros do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da MADCAM1

• MADCAM1 (proteína 1 de adesão celular do addressin da mucosa) é um receptor de adesão celular expresso em vênulas mucosas, que direciona o tráfego de linfócitos para tecidos mucosos, como as placas de Peyer e a lâmina própria intestinal.
• Ela se liga tanto à integrina α4β7 quanto à L-selectina, regulando assim a passagem e retenção de leucócitos. A isoforma 2, que não possui o domínio mucina-like, pode se especializar no fortalecimento da adesão dependente da integrina α4β7, independentemente da L-selectina.
• A proteína é uma glicoproteína transmembranar do tipo I pertencente à superfamília das imunoglobulinas, contendo domínios semelhantes a imunoglobulinas e uma região rica em mucina (na isoforma canônica).
• A localização subcelular é predominantemente na membrana plasmática, o que é consistente com seu papel nas interações célula-célula.
• Especificidade tecidual: Altamente expressa nas vênulas endoteliais altas (HEV) e nas vênulas da lâmina própria do intestino delgado; expressão mais baixa no cólon e baço. Expressão muito baixa no pâncreas e cérebro; ausente no timo, próstata, ovários, testículo, coração, placenta, pulmão, fígado, músculo esquelético, rim e leucócitos do sangue periférico.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação N-ligada e pontes dissulfeto, essenciais para a integridade estrutural e a ligação ao ligante. As palavras-chave também destacam a disponibilidade de splicing alternativo e estrutura 3D.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 100-200, uma região extracelular; considere que o anticorpo pode reconhecer MADCAM1 tanto nativa quanto desnaturada, mas a acessibilidade do epítopo em tecidos fixados deve ser validada.
• Para Western blot, é esperada uma banda em torno de 40 kDa em condições redutoras; use marcadores de peso molecular adequados e verifique com um controle positivo (por exemplo, lisado de tecido intestinal humano).
• No IHC-P, a recuperação de antígeno (por calor ou enzima) pode ser necessária para expor o epítopo; teste vários métodos de recuperação e diluições do anticorpo em tecidos positivos e negativos conhecidos.
• Condições de ELISA, como o tampão de revestimento e o sistema de detecção, devem ser otimizadas individualmente; um ensaio de competição com peptídeo pode ajudar a confirmar a especificidade.
• A reatividade cruzada é reportada para humano, camundongo e rato; para outras espécies, realize alinhamento de sequência e testes preliminares antes da aplicação.

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