mAb de coelho contra a triptase de mastócitos para WB, IHC-P, IP, ELISA - Q15661

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da triptase de mastócitos

• A triptase alfa/beta-1 (codificada por TPSAB1) é a principal protease serínica neutra armazenada nos grânulos secretores dos mastócitos, sendo liberada após a ativação e a desgranulação dos mastócitos.
• A isoforma 2 (também conhecida como triptase beta-1) cliva substratos grandes, como a fibronectina, com mais eficiência do que a isoforma 1, mas parece ser menos eficiente em relação a substratos pequenos. Referências relacionadas: PMID:18854315
• O gene TPSAB1 produz várias isoformas (TPS1, TPS2, TPSB1, TPSB2) por meio de splicing alternativo, sendo a triptase-2 uma das variantes.
• A localização subcelular é predominantemente extracelular, devido à secreção pelos mastócitos.
• Expressão tecidual: a isoforma 1 é predominante nos pulmões, estômago, baço, coração e pele; a isoforma 2 é expressa na aorta, no baço e em tumores mamários, com os níveis mais elevados nas células endoteliais de determinados vasos sanguíneos e níveis baixos nos mastócitos.
• A proteína apresenta um peptídeo-sinal, sofre glicosilação e contém ligações dissulfeto, sendo classificada como uma hidrolase protease serínica e zimógeno.
• O peso molecular da proteína madura é de aproximadamente 30,5 kDa, consistente com a banda observada de 31 kDa nas aplicações.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Como o imunógeno é um peptídeo sintético, o anticorpo provavelmente reconhece um epítopo linear; condições desnaturantes em WB podem ser adequadas.
• Para IHC-P, considere métodos de recuperação antigênica apropriados para a detecção de triptase em tecidos ricos em mastócitos, como pele ou pulmão.
• Para IP, valide a capacidade do anticorpo de precipitar a proteína de 31 kDa em condições não desnaturantes.
• Devido à reatividade cruzada com camundongo, o anticorpo pode ser usado em modelos murinos de alergia ou de biologia dos mastócitos, mas deve-se verificar a reatividade específica da espécie.
• Observe que a triptase pode ser liberada na forma solúvel; o ELISA pode exigir otimização das etapas de captura e detecção.
• O anticorpo é monoclonal, garantindo consistência entre lotes; inclua sempre controles apropriados.

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