Anticorpo Monoclonal de Coelho MCM5 para WB, IHC-P, IP, ELISA - P33992

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MCM5

• O fator de licenciamento de replicação de DNA MCM5 é um componente central do complexo MCM2-7, que funciona como a helicase replicativa essencial para o início e alongamento da replicação de DNA em células eucarióticas.
  Referências relacionadas:
  PMID:40940420

• O MCM5 é uma subunidade integral do complexo helicase CDC45-MCM-GINS (CMG), a máquina molecular responsável pelo desenrolamento do DNA molde na forquilha de replicação durante a fase S.
  Referências relacionadas:
  PMID:16899510
  PMID:32453425
  PMID:34694004

• A atividade ATPase do anel MCM2-7 é contribuída por seis sítios ativos formados nas interfaces das subunidades, com um motivo de dedo de arginina conservado fornecido em trans, embora esses sítios contribuam diferencialmente para a função da helicase.
  Referências relacionadas:
  PMID:32453425

• Localizado no núcleo e associado aos cromossomos, o MCM5 desempenha um papel crítico na garantia da replicação do DNA uma vez por ciclo celular, participando da montagem do complexo de pré-replicação.

• Modificações pós-traducionais do MCM5 incluem fosforilação, acetilação e conjugação de ubiquitina, que regulam sua função e interações proteicas dentro do sistema de licenciamento de replicação.

• O MCM5 também é conhecido pelos apelidos CDC46 e P1-CDC46, refletindo sua homologia com proteínas do ciclo de divisão celular de levedura, e pertence à família MCM de helicases dependentes de ATP.

• Mutações no MCM5 foram associadas à síndrome de Meier-Gorlin 8 (MGORS8), um distúrbio caracterizado por nanismo primordial e microcefalia, destacando seu papel essencial na proliferação celular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 635-734 dentro da região C-terminal do MCM5 humano (P33992); este epítopo pode ser acessível tanto em condições desnaturantes quanto nativas.
• Para western blotting, uma banda esperada em torno de 82 kDa deve ser observada em lisados de células inteiras de linhagens celulares humanas, de camundongo ou de rato; inclua marcadores de peso molecular apropriados e controles de carregamento.
• Em imuno-histoquímica, é recomendada a otimização dos métodos de recuperação de antígeno e da diluição do anticorpo primário para tecidos fixados em formol e embebidos em parafina, para alcançar uma coloração nuclear específica.
• O anticorpo pode ser eficaz para imunoprecipitação do MCM5 e co-imunoprecipitação de membros interativos do complexo MCM; valide com parceiros de interação conhecidos.
• Para ELISA, considere usar o anticorpo como reagente de captura ou detecção contra MCM5 recombinante ou lisados celulares; o emparelhamento com um clone não sobreposto pode melhorar o desempenho do ensaio sanduíche.

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