Anticorpo monoclonal de coelho anti-MDA5 para WB, IP, ELISA - Q9BYX4

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do MDA5

• O MDA5, codificado pelo gene IFIH1, é um receptor da imunidade inata que atua como sensor citoplasmático de ácidos nucleicos virais, desencadeando respostas antivirais, incluindo a indução de interferon do tipo I e de citocinas pró-inflamatórias. Referências relacionadas: PMID:28594402, PMID:32169843, PMID:33727702
• Seus ligantes incluem RNA de fita dupla longo (>1 kb) e mRNA sem 2'-O-metilação na extremidade 5' cap, permitindo a discriminação entre RNA próprio e não próprio. Referências relacionadas: PMID:22160685
• Após a ligação ao RNA viral, o MDA5 sofre alterações conformacionais e associa-se ao MAVS/IPS1 nas mitocôndrias, levando à fosforilação de IRF3/IRF7 e à transcrição de genes de interferon.
• O MDA5 está criticamente envolvido na detecção de membros da família Picornaviridae (por exemplo, o vírus da encefalomiocardite) e de coronavírus, incluindo o SARS-CoV-2. Referências relacionadas: PMID:28606988, PMID:33440148, PMID:33514628
• A proteína contém dois domínios CARD N-terminais, um domínio helicase DExD/H-box central com atividade ATPase e um domínio regulador C-terminal; localiza-se predominantemente no citoplasma, mas também no núcleo e nas mitocôndrias.
• Modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e ISGilação, regulam a sinalização do MDA5 para evitar respostas aberrantes de interferon; mutações estão associadas à síndrome de Aicardi-Goutières e ao diabetes tipo 1.
• É amplamente expressa em níveis baixos, com expressão relativamente mais elevada na placenta, no pâncreas e no baço.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para Western blot, espera-se que o anticorpo detecte a proteína IFIH1/MDA5 de comprimento completo em aproximadamente 117 kDa; uma banda de 25 kDa também pode aparecer devido a splicing alternativo ou clivagem. Valide no sistema de amostra relevante.
• Em ensaios de imunoprecipitação, considere a localização citoplasmática e mitocondrial do MDA5 e a natureza dinâmica de seus complexos de ativação.
• Para ELISA, este anticorpo monoclonal recombinante pode ser utilizado como reagente de captura ou detecção; combine-o com um anticorpo de detecção cuidadosamente selecionado para garantir sensibilidade e especificidade.
• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aminoácidos 1–205), que inclui os domínios CARD tandem; essa região é altamente conservada e essencial para a sinalização antiviral.

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