Anticorpo policlonal de coelho anti-MDA5 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9BYX4

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da MDA5 (IFIH1)

• Codifica a proteína 1 contendo o domínio helicase C induzida por interferon (IFIH1), também conhecida como proteína 5 associada à diferenciação do melanoma (MDA5), receptor semelhante ao RIG-I 2 (RLR-2), Helicard e autoantígeno CADM-140. Pertence à família de receptores semelhantes ao RIG-I, que são receptores citoplasmáticos de reconhecimento de padrões.
• Atua como um sensor fundamental da imunidade inata que detecta RNA viral no citoplasma, desencadeando respostas antivirais, incluindo a produção de interferon do tipo I e citocinas pró-inflamatórias. Referências relacionadas: PMID:28594402 PMID:32169843 PMID:33727702
• Reconhece especificamente o mRNA sem 2'-O-metilação na capa 5' e o RNA de fita dupla longo (>1 kb) como assinaturas não próprias de uma infecção viral. Referência relacionada: PMID:22160685
• Após a ligação ao ligante, localiza-se nas mitocôndrias e associa-se a MAVS/IPS1, levando à ativação das cinases TBK1 e IKBKE, à fosforilação de IRF3 e IRF7 e à indução transcricional de interferons (IFN-α e IFN-β).
• Detecta uma ampla variedade de vírus, incluindo Picornaviridae (por exemplo, vírus da encefalomiocardite e rinovírus), coronavírus (incluindo SARS-CoV-2), flavivírus (dengue e vírus do Nilo Ocidental), reovírus e vírus vaccinia. Referências relacionadas: PMID:28606988 PMID:33440148 PMID:33514628
• Amplifica a sinalização da imunidade inata ao reconhecer metabólitos de RNA gerados pela endorribonuclease antiviral RNase L, reforçando a defesa do hospedeiro.
• É amplamente expressa em níveis baixos, com expressão relativamente mais elevada na placenta, no pâncreas e no baço, e quase indetectável no cérebro, nos testículos e nos pulmões.
• Está presente no citoplasma e no núcleo, associando-se às mitocôndrias após a ativação. Estruturalmente, contém dois domínios CARD N-terminais e um domínio helicase C-terminal com atividades de ligação a ATP e RNA. Variações genéticas em IFIH1 estão associadas a doenças autoimunes, como a síndrome de Aicardi-Goutières e o diabetes tipo 1.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange os 205 aminoácidos N-terminais, que incluem os dois domínios CARD. Esse design pode reconhecer tanto a IFIH1 de comprimento completo (aproximadamente 117 kDa, conforme previsto) quanto possíveis produtos de clivagem ou isoformas (aproximadamente 25 kDa) observados em determinados contextos.
• Na análise por western blot, foram relatadas bandas de 25 kDa e 117 kDa; valide o padrão de expressão nos lisados de células ou tecidos relevantes e considere o uso de controles positivos (por exemplo, amostras infectadas por vírus ou estimuladas por interferon) para uma detecção robusta.
• Para imuno-histoquímica e imunofluorescência, podem ser necessárias condições de recuperação antigênica; recomenda-se realizar experimentos preliminares com tecidos positivos conhecidos (por exemplo, placenta e pâncreas).
• Como se trata de um anticorpo policlonal, pode ocorrer variabilidade entre lotes; titule o anticorpo para cada nova aplicação e inclua controles apropriados para garantir a especificidade.

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