MICA Coelho pAb para WB, ELISA - Q29983

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da MICA

• MICA (sequência A relacionada ao polipeptídeo da classe I do MHC) é um membro da família MIC de proteínas induzíveis por estresse, também conhecida como MIC-A ou PERB11.1.
• Ela atua como ligante para o imunorreceptor ativador NKG2D/KLRK1, que é expresso em praticamente todas as células assassinas naturais (NK) humanas, células T γδ e células T αβ CD8+. Referências relacionadas: PMID:11491531 PMID:11777960
• A ligação do NKG2D pela MICA estimula a citotoxicidade mediada por células NK e a produção de citocinas, desempenhando um papel central nas respostas imunes inatas e adaptativas. Referências relacionadas: PMID:10426993
• A MICA é regulada positivamente em condições de estresse celular, incluindo infecções virais e bacterianas, danos no DNA e choque térmico, servindo assim como um sinal de perigo para o sistema imunológico.
• A proteína está localizada principalmente na membrana celular, mas também pode ser encontrada no citoplasma; ela é amplamente expressa nos tecidos, exceto no sistema nervoso central, com forte expressão no epitélio gástrico, queratinócitos, células endoteliais e vários tumores epiteliais.
• A MICA sofre várias modificações pós-tradução, incluindo glicosilação N-ligada, palmitoilação e formação de pontes dissulfeto, e contém um domínio do tipo imunoglobulina.
• O splicing alternativo produz múltiplas isoformas, e a proteína pode ser clivada proteoliticamente da superfície celular, gerando uma forma solúvel que modula as respostas imunes.
• A MICA está implicada na vigilância imunológica tumoral, distúrbios autoimunes e interações hospedeiro-vírus, tornando-se um biomarcador chave e alvo terapêutico em oncologia e imunologia.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína de fusão recombinante que cobre os aminoácidos 24–307 (NP_000238.1), que corresponde ao domínio extracelular da MICA humana. Prevê-se que essa região esteja exposta e pode apresentar epítopos nativos.
• No Western blotting, espera-se uma banda de aproximadamente 43 kDa em condições redutoras; no entanto, devido à glicosilação, o peso molecular observado pode ser ligeiramente maior. Recomenda-se a validação no sistema de amostra relevante.
• Para aplicações em ELISA, a cobertura com a proteína recombinante ou o uso de um formato sanduíche deve ser otimizada; considere a titulação em tabuleiro de xadrez para obter concentrações ideais de anticorpo e antígeno.
• O anticorpo apresenta reatividade cruzada com humano, camundongo e rato, mas o desempenho em outras espécies não foi testado e deve ser validado independentemente.
• O bloqueio padrão com 5% de leite desnatado ou BSA é comumente usado para WB; se for observado alto fundo, tente ajustar o agente de bloqueio ou as condições do tampão.

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