Anticorpo Policlonal de Coelho MonoMetil-Histona H2B-K5 (P62807/Q16778) para WB, IF/ICC, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H2B

A histona H2B é um componente central do nucleossomo, envolvendo e compactando o DNA em cromatina. Esta compactação limita a acessibilidade do DNA e desempenha um papel central na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. A H2B existe como várias isoformas codificadas por genes distintos, com os acessos UniProt P62807 (Histona H2B tipo 1-C/E/F/G/I) e Q16778 (Histona H2B tipo 2-E) representando as principais variantes.

Além de seu papel estrutural, a H2B possui ampla atividade antibacteriana e pode contribuir para a barreira antimicrobiana do epitélio colônico e para a atividade bactericida do líquido amniótico.

A H2B é extensivamente modificada pós-traducionalmente, contribuindo para o "código das histonas" que regula a dinâmica da cromatina. As modificações incluem acetilação, metilação, fosforilação, crotonilação e ubiquitinação em múltiplos resíduos de lisina, serina e arginina. A monometilação específica na lisina 5 (K5me1) é uma dessas marcas que pode influenciar a expressão gênica e o estado da cromatina. O anticorpo aqui descrito foi produzido contra um peptídeo sintético monometilado correspondente à K5me1 da H2B humana, fornecendo uma ferramenta para pesquisa epigenética.

A histona H2B localiza-se no núcleo e nos cromossomos, consistente com sua função nucleossômica.

Referências relacionadas: Modificações de histonas como acetilação e metilação foram extensivamente caracterizadas PMID:16627869. Estudos adicionais identificaram novas acilações, incluindo crotonilação PMID:21925322 e lactilação PMID:31645732 em lisinas da H2B.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting (WB), use extratos nucleares para enriquecer proteínas histonas. O sinal para MonoMetil-H2B-K5 pode ser baixo; considere usar ensaios de competição com peptídeo para confirmar a especificidade.
• Na imunofluorescência (IF/ICC), garanta uma permeabilização celular adequada e considere a pré-extração de cromatina para melhorar a acessibilidade do anticorpo aos alvos de histona.
• Para ensaios baseados em ELISA, recubra as placas com o peptídeo monometilado ou extratos de histonas e valide com o anticorpo.
• O anticorpo tem ampla reatividade cruzada prevista (humano, camundongo, rato e outros); no entanto, verifique a reatividade em seu sistema de amostra específico com controles apropriados.
• Como com qualquer anticorpo específico para modificação pós-traducional, pode ocorrer variabilidade entre lotes; inclua controles positivos e negativos conhecidos em cada experimento.

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