Anticorpo Policlonal de Coelho MonoMetil-Histona H3 (K14) (Q16695/P68431) para WB, IF, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

• A Histona H3 é um componente central do nucleossoma, envolvendo e compactando o DNA em cromatina. Isto limita a acessibilidade do DNA e desempenha um papel central na regulação da transcrição, reparação do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossómica.
• Existem múltiplas variantes de H3; este anticorpo reconhece tanto a H3.1 somática (SWISS: P68431) como a H3.1t específica dos testículos (SWISS: Q16695). A H3.1t é expressa predominantemente em células testiculares.
• A Histona H3 sofre extensas modificações pós-traducionais, coletivamente referidas como "código de histonas", que regulam a dinâmica da cromatina. Estas incluem metilação, acetilação, fosforilação e outras em numerosos resíduos. Referências relacionadas: PMID:16185088, PMID:16267050, PMID:10464286
• A monometilação na lisina 14 (H3K14me1) está associada à regulação transcricional e é um substrato para desmetilases específicas de lisina. O anticorpo foi produzido contra um péptido monometilado em torno de K14 e espera-se que reconheça especificamente esta modificação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi produzido contra um péptido monometilado sintético correspondente a resíduos em torno de K14 da Histona H3 humana; espera-se que reconheça a forma monometilada, mas a reatividade cruzada com H3 não modificada ou outras modificações deve ser avaliada.
• Para Western blot, espera-se uma banda a aproximadamente 15 kDa correspondente à Histona H3. Considere incluir controlos apropriados (por exemplo, lisados de células tratadas com inibidores de histona desacetilase/metiltransferase) para verificar a especificidade.
• Para IF/ICC, as condições de fixação e permeabilização podem afetar a acessibilidade do epítopo; é recomendada otimização.
• O ELISA pode ser usado para quantificar níveis relativos de monometilação H3K14; o uso de competidores peptídicos pode confirmar a especificidade da ligação.

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