MonoMethyl-Histona H3-K27 mAb de Coelho (Q16695/P68431) – Anticorpo de Histona H3 Metilada para WB, IF/ICC, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

• A Histona H3 é um componente central do nucleossomo, enrolando e compactando o DNA em cromatina. Esta estrutura limita a acessibilidade do DNA às maquinarias celulares, desempenhando, portanto, um papel central na regulação da transcrição, reparo de DNA, replicação de DNA e estabilidade cromossômica. A acessibilidade do DNA é regulada por meio de um conjunto complexo de modificações pós-traducionais de histonas, também chamado de código de histonas, e remodelagem de nucleossomos. Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

• A Histona H3 localiza-se no núcleo e associa-se aos cromossomos. Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

• As isoformas canônicas de histona H3.1 (codificadas por múltiplos genes) são geralmente expressas em células em divisão, enquanto a variante H3.1t (Q16695) é especificamente expressa em células testiculares. Referências relacionadas: UniProt Q16695

• A Histona H3 sofre extensas modificações pós-traducionais, incluindo metilação, acetilação, fosforilação e citrulininação em resíduos específicos. A Lisina 27 (K27) é um sítio de modificação conhecido; seu estado monometilado (H3K27me1) está associado à regulação gênica. Referências relacionadas: PMID:16567635

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo monometilado sintético ao redor da K27, sugerindo alta especificidade para a marca H3K27me1. Ao usar o anticorpo, considere incluir controles de peptídeo metilado e não modificado em ensaios de dot blot ou ELISA para validar a especificidade.
• Para Western blotting (WB), são recomendados extratos ácidos enriquecidos em histonas ou lisados nucleares totais. Uma quantidade típica de carregamento de 10–20 µg de extrato nuclear pode ser usada, mas é aconselhável a otimização no sistema de amostra relevante.
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), a permeabilização com Triton X-100 ou detergente semelhante é necessária para permitir a coloração nuclear. A coloração simultânea com um anticorpo de H3 total pode ajudar a normalizar os sinais de metilação.
• A reatividade cruzada é prevista em uma ampla gama de espécies devido à conservação da sequência; no entanto, valide sempre o anticorpo na espécie ou tecido alvo se não tiver sido testado anteriormente.
• Este anticorpo é aplicável para pesquisas epigenéticas focadas em modificações de histonas e dinâmica da cromatina; considere seu uso em aplicações do tipo ChIP após validação cuidadosa.

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