Anticorpo Policlonal de Coelho MonoMethyl-Histona H3-K36 (Q16695 / P68431) para WB, IF/ICC, ELISA, ChIP-seq

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

A histona H3 é um componente central do nucleossomo, que envolve e compacta o DNA em cromatina. Assim, as histonas desempenham um papel central na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. A acessibilidade do DNA é regulada por meio de um conjunto complexo de modificações pós-traducionais das histonas, também chamado de código das histonas, e do remodelamento de nucleossomos.

A histona H3 localiza-se no núcleo e nos cromossomos, consistente com seu papel fundamental na estrutura da cromatina.

Os acessos UniProt Q16695 e P68431 correspondem à histona H3.1t (específica de testículo) e H3.1 (canônica), respectivamente. H3.1t (Q16695) é expressa em células testiculares, enquanto H3.1 (P68431) é amplamente expressa como uma histona dependente de replicação.

A histona H3 sofre extensas modificações pós-traducionais em numerosos resíduos, incluindo metilação, acetilação, fosforilação e outras. Notavelmente, a monometilação na lisina 36 (correspondente ao resíduo 37 da proteína completa) foi identificada em estudos proteômicos. Esta modificação é uma das muitas que contribuem para o código das histonas e regulam a função da cromatina.

Referências relacionadas: PMID:15983376, PMID:16185088, PMID:16267050

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para o Western blot (WB), espera-se uma banda em torno de 15 kDa. Considere o uso de extratos nucleares e a validação da especificidade com um ensaio de competição com peptídeo monometilado.
• Na imunofluorescência (IF/ICC), deve-se observar coloração nuclear. As condições de fixação e permeabilização podem exigir otimização; considere testar a fixação com paraformaldeído versus metanol.
• Para ChIP‑seq, este anticorpo pode ser usado para mapear a distribuição de H3K36me1 em todo o genoma. Inclua controles apropriados, como DNA de entrada e uma IgG não imune. H3K36me1 é tipicamente enriquecido nos corpos dos genes de genes ativamente transcritos.
• Prevê-se que o anticorpo tenha reatividade cruzada ampla entre espécies com base na conservação da sequência. A validação em amostras não humanas, de camundongo ou rato é recomendada antes do uso.
• Combine com outros anticorpos de modificação de histonas para estudar o crosstalk epigenético. Sempre valide no sistema de amostra relevante e considere a consistência entre lotes para aplicações quantitativas.

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