Anticorpo monoclonal de coelho para MonoMetil-Histona H3-K79 (Q16695/P68431) – WB, ChIP, IHC-P, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

• A Histona H3 é um componente central dos nucleossomos, essencial para o empacotamento do DNA na cromatina. Desempenha um papel fundamental na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e manutenção da estabilidade cromossômica. Modificações pós-traducionais (MPTs) na histona H3, como metilação, acetilação, fosforilação e ubiquitilação, formam um "código de histonas" dinâmico que modula a acessibilidade da cromatina e a expressão gênica.
  Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

• Subcelularmente, a histona H3 se localiza no núcleo e nos cromossomos. Entre as variantes da H3, a H3.1t (Q16695) é expressa principalmente nas células testiculares, enquanto a H3.1 (P68431) é codificada por um conjunto de genes dependentes da replicação e representa a forma somática canônica da H3.
  Referências relacionadas: UniProt Q16695 (especificidade tecidual), UniProt P68431 (localização subcelular)

• A lisina 79 (K79) da histona H3 é um resíduo bem caracterizado que sofre mono-, di- e trimetilação. Esses estados de metilação exercem influências regulatórias distintas sobre a estrutura e função da cromatina, estando a K79me1 implicada em processos como alongamento da transcrição e silenciamento telomérico.
  Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431 (modificações anotadas em K79)

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Projeto do Imunógeno: O imunógeno é um peptídeo sintético monometilado que circunda a K79 da histona H3 humana. Para aplicações que exigem alta especificidade para K79me1, considere usar histona H3 não modificada ou peptídeos K79 di- e trimetilados como controles negativos para confirmar a seletividade do anticorpo.
• Western Blotting (WB): É esperada uma banda de aproximadamente 15 kDa em lisados totais de células de amostras humanas, de camundongo ou rato. Otimize a diluição do anticorpo e as condições de incubação para o seu tipo específico de amostra.
• Imunoprecipitação da Cromatina (ChIP/ChIP-seq): Este anticorpo é adequado para ChIP nativo ou reticulado. Valide a eficiência de enriquecimento por qPCR ou sequenciamento com loci genômicos positivos e negativos apropriados.
• ELISA e DB: Ensaios de ligação direta podem ser utilizados; certifique-se de que o peptídeo de revestimento mantenha o status de metilação correto.
• Reatividade Cruzada: A ampla reatividade cruzada prevista sugere a conservação do epítopo K79me1 entre espécies. Verifique o desempenho em espécies menos comuns por meio de experimentos piloto.
• Armazene e manuseie conforme recomendado; enviado em bolsas de gelo.

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