pAb de coelho para MonoMetil-Histona H3-K9 (Q16695/P68431) para WB, ChIP-seq, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

• A Histona H3 é um componente central do nucleossomo, que envolve e compacta o DNA em cromatina. Esse papel estrutural é fundamental para a regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431
• As variantes H3.1 e H3.1t (codificadas por genes como H3C1, H3C2, etc., e H3-4, respectivamente) compartilham alta similaridade de sequência e se localizam no núcleo e nos cromossomos. Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431
• A H3.1t (Q16695) é expressa especificamente nas células testiculares, sugerindo um papel especializado na organização da cromatina durante a espermatogênese. Referências relacionadas: UniProt Q16695
• As histonas sofrem uma ampla gama de modificações pós-traducionais, incluindo metilação, acetilação, fosforilação e ubiquitinação. A lisina 9 da histona H3 (H3K9) é um resíduo crítico para a metilação, com estados de mono-, di- e trimetilação, cada um com resultados biológicos distintos. Este anticorpo foi desenvolvido contra um peptídeo monometilado sintético ao redor da K9, permitindo a detecção específica de H3K9me1. Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431
• A regulação dinâmica da metilação de H3K9 está envolvida na formação da heterocromatina, repressão transcricional e herança epigenética. A monometilação (H3K9me1) está frequentemente associada a regiões eucromáticas e ativação gênica, embora seu papel funcional possa variar de acordo com o contexto genômico. Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting (WB), recomendamos o uso de lisados enriquecidos em fração nuclear para aumentar a detecção da histona H3. O peso molecular previsto é de ~15 kDa; ajuste a porcentagem de acrilamida no gel e as condições de transferência de acordo com esse valor. Sempre inclua marcadores de peso molecular adequados.
• Ao usar este anticorpo em aplicações baseadas em imunoprecipitação, como ChIP e ChIP-seq, verifique a especificidade incluindo controles negativos (por exemplo, peptídeo não metilado, ou células/tecido sem a modificação) e controles positivos (por exemplo, células conhecidas por apresentarem H3K9me1). A otimização da ligação cruzada e a eficiência da fragmentação são pontos críticos.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P) ou imunofluorescência (IF/ICC), considere métodos de recuperação de antígeno e etapas de permeabilização para expor os epítopos nucleares. Valide a coloração em tecidos conhecidos como positivos e negativos.
• Dada a ampla reatividade cruzada prevista, espera-se que o anticorpo reconheça H3K9me1 em humano, camundongo, rato e outras espécies. Ainda assim, recomendamos confirmar a reatividade no seu sistema de amostra específico.

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