Anticorpo policlonal de coelho MonoMethyl-Histone H3-R26 – Q16695/P68431 para WB, IF/ICC, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

• A Histona H3 é um componente central do nucleossoma, desempenhando um papel fundamental na embalagem do DNA e organização da cromatina. É crítica para processos como transcrição, replicação e reparação do DNA. Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431
• A Histona H3 localiza-se predominantemente no núcleo e está associada aos cromossomas. Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431
• As modificações pós-traducionais na histona H3, coletivamente referidas como o código das histonas, regulam a atividade genética e os estados da cromatina. Modificações importantes incluem metilação em vários resíduos de arginina e lisina. Por exemplo, resíduos de arginina podem ser monometilados, simétrica ou assimetricamente dimetilados por proteinas arginina metiltransferases, influenciando os resultados transcricionais (por exemplo, metilação R3 por PRMT6, PMID: 17898714, PMID: 18077460; metilação R17 por CARM1, PMID: 15345777). A monometilação em R26 é uma modificação específica de interesse. Referências relacionadas: PMID:17898714, PMID:18077460, PMID:15345777
• As variantes da Histona H3 apresentam expressão específica de tecido: H3.1t (Q16695) é expressa principalmente em células testiculares, enquanto a H3.1 canónica (P68431) é ubíqua. Referências relacionadas: UniProt Q16695 (declaração de especificidade de tecido).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um péptido monometilado sintético em torno da arginina 26 da histona H3 humana. Ao usar este anticorpo, considere que ele pode reconhecer preferencialmente a forma monometilada; a reatividade cruzada com estados não metilados ou outros estados metilados (por exemplo, dimetil) deve ser validada no seu sistema experimental específico.
• Para Western blot (WB), lisados enriquecidos nucleares são recomendados para melhorar a deteção da histona H3. Otimize as condições de carregamento e transferência apropriadas para proteínas de baixo peso molecular (~15 kDa).
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), os métodos de permeabilização e fixação podem afetar a acessibilidade do epítopo; valide o padrão de coloração em controlos positivos e negativos apropriados.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado para detetar péptidos H3 monometilados; considere usar ensaios competitivos para confirmar a especificidade.
• Como a reatividade é prevista para uma ampla gama de espécies além de humano, rato e rato, a validação em outras espécies é aconselhada.

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