Anticorpo Policloonal de Coelho contra MonoMetil-Histona H3-R8 (Q16695/P68431) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3.1t/H3.1

A Histona H3 é um componente central do nucleossomo, que envolve o DNA na formação da cromatina e limita a acessibilidade para processos de transcrição, replicação e reparo. As modificações pós-traductionais (PTMs) das caudas das histonas constituem um "código de histonas" que regula esses processos.
Referências relacionadas: UniProt: Q16695, P68431.

O genoma humano codifica múltiplas variantes da H3: a H3.1 é ubíqua e codificada por vários genes (H3C1–H3C12), enquanto a H3.1t (H3-4/HIST3H3) é específica do testículo.
Referências relacionadas: UniProt: Q16695.

A arginina 8 (R8) na cauda N-terminal pode sofrer monometilação (alvo deste anticorpo), dimetilação simétrica (por PRMT5) ou citrulinação. Essas marcações influenciam os estados da cromatina e a expressão gênica.
Referências relacionadas: PMID:15345777, PMID:16567635.

A Histona H3 se localiza no núcleo e nos cromossomos, com peso molecular previsto de aproximadamente 15 kDa.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético monometilado ao redor da arginina 8; o anticorpo deve detectar primariamente a H3R8 monometilada. Verifique a especificidade com lisados/peptídeos controle para excluir reatividade cruzada com dimetilação simétrica ou citrulinação no mesmo sítio.
• Para Western blotting, o enriquecimento de histonas (extração ácida) geralmente melhora o sinal; a banda esperada é de ~15 kDa.
• Em IHC-P, a recuperação de antígeno induzida por calor e o tecido testicular (rico em H3.1t) são recomendados como controles positivos.
• Para IF/ICC, otimize a fixação e permeabilização, pois o alvo é nuclear.
• Os ensaios de ELISA podem se beneficiar da inclusão de um padrão de peptídeo monometilado para calibração.
• Prevê-se reatividade em humano, camundongo, rato e outras espécies devido à conservação da sequência; no entanto, é aconselhável a validação no sistema de amostra relevante.
• Como anticorpo policlonal, a consistência entre lotes pode variar; sempre re-titule e valide novos lotes.

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