Anticorpo Policlonal de Coelho MonoMethyl-Histone H4-K20 (P62805) para Pesquisa Epigenética, WB/ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H4

A histona H4 é um componente central do nucleossomo, enrolando e compactando o DNA em cromatina. Isso limita a acessibilidade do DNA e desempenha um papel central na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. A acessibilidade do DNA é regulada por um conjunto complexo de modificações pós-traducionais, coletivamente denominadas código de histonas, e remodelagem de nucleossomos. Referências relacionadas: UniProt P62805

A histona H4 localiza-se no núcleo e é um componente estrutural dos cromossomos. A H4 acetilada é detectada no núcleo de espermátides no estágio 11. Referências relacionadas: UniProt P62805

A lisina 20 da histona H4 (correspondente à posição 21 na proteína de comprimento total) está sujeita a mono-, di- e trimetilação. A monometilação em H4K20 tem sido implicada na compactação da cromatina, formação de heterocromatina e resposta a danos no DNA. Essas modificações adicionam diversidade funcional ao código de histonas. Referências relacionadas: PMID:12086618, PMID:15964846, PMID:17967882

A histona H4 é altamente conservada entre as espécies, com uma ampla gama de outras modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, citrulinação, fosforilação e ubiquitinação em múltiplos resíduos. Essa conservação torna a H4 um alvo valioso para o estudo da regulação epigenética em diversos organismos modelo. Referências relacionadas: UniProt P62805

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo monometilado sintético em torno da K20; considere verificar a especificidade do anticorpo por ELISA de competição de peptídeos usando peptídeos K20 não modificados, mono-, di- e trimetilados.
• Para Western blot, a extração ácida de histonas ou fracionamento nuclear é recomendado para enriquecer a histona H4. O peso molecular previsto é de aproximadamente 11 kDa; use um gel de SDS-PAGE a 15% ou gel gradiente para separação ideal de histonas de baixo peso molecular.
• Dada a ampla reatividade cruzada prevista (humano, camundongo, rato e outros), valide o anticorpo no sistema de amostra relevante, pois a intensidade do sinal pode variar dependendo dos níveis endógenos de metilação.
• Um ensaio de ELISA pode ser usado para quantificar os níveis relativos de H4K20 monometilada usando preparações de histonas padronizadas.

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