Anticorpo Policlonal de Coelho MonoMethyl-NONO/p54nrb (R357/R365) (Q15233) para WB, IF/ICC, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NONO/p54nrb

NONO (proteína de ligação ao octâmero que não contém domínio POU), também conhecido como p54nrb, é uma proteína de ligação a DNA e RNA multifuncional envolvida em diversos processos nucleares. Liga-se a DNA e RNA de fita dupla e simples, participa do splicing de pré-mRNA provavelmente como um heterodímero com SFPQ e interage com o U5 snRNA. O NONO é essencial para a formação de paraspeckles junto com a PSPC1 e contribui para o reparo de DNA via junção de extremidades não homólogas (NHEJ) estabilizando as extremidades do DNA com o dímero Ku70/Ku80.

Na regulação transcricional, o NONO forma um complexo com SFPQ e NR5A1 para modular a atividade do promotor CYP17. Também regula o relógio circadiano reprimindo a transativação do CLOCK-BMAL1, influencia a organização das sinapses GABAérgicas e promove a diferenciação neuronal recrutando a TET1 para loci genômicos.

O NONO desempenha um papel crítico na imunidade inata montando o complexo HDP-RNP, que serve como plataforma para a fosforilação do IRF3, ativando assim a via cGAS-STING em resposta à infecção por vírus de DNA. Durante a infecção por HIV-2, o NONO interage com a proteína do capsídeo viral p24 para facilitar a detecção do DNA viral pelo cGAS.

A nível subcelular, o NONO é predominantemente nuclear, concentrando-se em nucléolos, speckles nucleares e paraspeckles puntiformes adjacentes aos speckles de splicing.

O NONO é amplamente expresso no coração, cérebro, placenta, pulmão, fígado, músculo esquelético, rim, pâncreas e várias linhagens celulares de tumor de mama. A proteína sofre extensas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e metilação (por exemplo, monometilação em R456). Este anticorpo reconhece especificamente a forma mono-metilada nas argininas 357 e 365.

Referências relacionadas: PMID:11525732, PMID:12403470, PMID:26571461, PMID:22416126, PMID:15590677, PMID:11897684, PMID:28712728, PMID:30270045, PMID:9341872, PMID:19608861, PMID:24129315

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo policlonal de coelho foi produzido contra um peptídeo sintético que carrega monometilação em R357 e R365 de NONO/p54nrb humano. Para Western blot, espera-se uma banda em torno de 54 kDa. Valide a especificidade comparando a intensidade do sinal com competição de peptídeo não metilado ou usando controles específicos de metilação.
• Para IF/ICC, pode ser observada coloração nuclear com enriquecimento em focos (paraspeckles). Considere a coloração simultânea com marcadores de paraspeckles (por exemplo, PSPC1) para confirmar a localização.
• Declara-se que o anticorpo reage com amostras humanas e de rato. A reatividade cruzada com outras espécies não foi testada; verifique no seu sistema modelo.
• As diluições de trabalho ideais devem ser determinadas empiricamente para cada aplicação. Comece com 1:500–1:1000 para WB e 1:50–1:200 para IF/ICC, ajustando conforme necessário.
• O anticorpo é fornecido como líquido com envio em saco de gelo; armazene a −20°C após o recebimento. Evite ciclos repetidos de congelação-descongelação.

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