MonoMethyl-UHRF1-K385 Coelho pAb (Q96T88) - Anticorpo de Epigenética para WB, DB, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da UHRF1

• A UHRF1 (ligase de ubiquitina-proteína E3 UHRF1) é um regulador epigenético fundamental que conecta a metilação do DNA e a modificação da cromatina. Desempenha um papel crítico na herança dos padrões de metilação do DNA ao recrutar a DNMT1 para o DNA hemi-metilado durante a replicação, garantindo assim a propagação fiel das marcas de metilação. Referências relacionadas: PMID:10646863, PMID:15009091, PMID:19056828, PMID:23022729, PMID:24013172, PMID:27595565, PMID:30104358, PMID:30392929, PMID:30392931, PMID:39607687.
• Atuando tanto como leitora quanto escritora de histonas, a UHRF1 reconhece especificamente H3K9me3 e H3R2me0, o que ativa sua atividade de ligase E3 de ubiquitina. Em seguida, ela monoubiquitina a histona H3 na Lis-18 (H3K18ub), criando um local de ancoragem para a DNMT1. Também ubiquitina H3K14 e H3K23 em menor grau. Referências relacionadas: PMID:15361834, PMID:17673620, PMID:17967883, PMID:18772889, PMID:21745816, PMID:21777816, PMID:22100450, PMID:22837395, PMID:23022729, PMID:27595565, PMID:30104358, PMID:24013172.
• Além de seu papel na metilação do DNA, a UHRF1 participa no reparo do DNA cooperando com a UHRF2 para garantir o recrutamento de FANCD2 para ligações cruzadas intercadeias. Ela também ubiquitina proteínas não histonas, como KIF11 e PML, influenciando a arquitetura do fuso e outros processos. Referências relacionadas: PMID:30335751, PMID:22945642, PMID:37728657.
• A UHRF1 localiza-se predominantemente no núcleo e associa-se aos cromossomos durante a fase S, particularmente na heterocromatina pericêntrica em replicação. Em células não-S, distribui-se homogeneamente pelo núcleo. Referências relacionadas: PMID:10646863, PMID:17673620, PMID:17967883, PMID:21777816.
• A expressão tecidual é observada no timo, medula óssea, testículo, pulmão e coração, com superexpressão relatada no câncer de mama. Referências relacionadas: PMID:10646863, PMID:12838312, PMID:15361834.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para detecção por Western blot, considere enriquecer extratos nucleares ou frações de cromatina para melhorar o sinal para UHRF1 e suas variantes metiladas.
• Como o anticorpo reconhece especificamente K385 monometilado, use controles de peptídeo não modificado e diferencialmente metilado em ensaios de dot blot (DB) ou ELISA para confirmar a especificidade.
• A expressão e modificação da UHRF1 são dependentes do ciclo celular; sincronizar células para a fase S pode melhorar a detecção do alvo.
• Relata-se que o anticorpo tem reatividade cruzada com UHRF1 de camundongo e rato; no entanto, valide na espécie e tipo de amostra relevantes para garantir o desempenho esperado.
• Otimize as condições de bloqueio e lavagem, pois anticorpos específicos para metilação podem exigir ajustes cuidadosos para minimizar a ligação inespecífica.

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