Anticorpo Monoclonal de Camundongo anti-CD15/SSEA-1 Humano para Citometria de Fluxo - P22083

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Alfa-(1,3)-fucosiltransferase 4 (FUT4)

• A alfa-(1,3)-fucosiltransferase 4 (FUT4) é uma glicosiltransferase residente no Golgi que sintetiza o determinante glicano Lewis X (LeX) (CD15) através da transferência de fucose em ligação alfa(1,3) à N-acetilglucosamina (GlcNAc) em cadeias de lactosamina do tipo 2. Referências relacionadas: PMID:1702034, PMID:1716630, PMID:29593094
• O CD15/LeX é um glicoepítopo-chave da superfície celular envolvido na adesão celular, migração e reconhecimento de células imunitárias, particularmente através de interações com selectinas (SELE, SELL, SELP) durante o tráfego e o homing de leucócitos.
• A FUT4 atua em conjunto com a FUT7 para decorar ligandos de selectina com glicanos fucosilados, um passo crítico na recirculação de linfócitos e nas respostas inflamatórias.
• A enzima também pode modificar aceitadores sialilados para gerar os determinantes sialil Lewis X e 6‑sulfo sialil Lewis X, que servem como ligandos de alta afinidade para a mesma família de selectinas. Referências relacionadas: PMID:1716630, PMID:29593094
• A FUT4 localiza-se exclusivamente na membrana do Golgi medial/trans através de uma âncora de sinal N‑terminal, compatível com o seu papel no processamento terminal de glicanos.
• A expressão tecidular inclui células-tronco mesenquimais, linhagens mieloides e linfoides, e promielócitos imaturos, associando o CD15 tanto à diferenciação hematopoiética como à biologia das células-tronco.
• Adicionalmente, a FUT4 pode fucosilar unidades LacNAc internas para formar o epítopo VIM‑2, outra estrutura de ligação a selectinas, diversificando ainda mais os repertórios de glicanos da superfície celular. Referências relacionadas: PMID:11278338, PMID:1716630

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo conjugado com está pronto a usar para citometria de fluxo direta; titule o anticorpo de 0,5–5 µg/mL para determinar a concentração ótima de coloração para o seu tipo celular.
• Utilize células humanas vivas e não fixadas (p. ex., leucócitos do sangue periférico ou linhas celulares em cultura) para preservar o epítopo de carboidrato nativo, uma vez que a fixação pode alterar o reconhecimento do CD15.
• Inclua o controlo de isótipo adequado e utilize bloqueio de recetores Fc para avaliar a ligação inespecífica.
• Se for necessária coloração intracelular do Golgi, os protocolos de permeabilização devem ser otimizados para reter as estruturas de membrana.

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