Anticorpo monoclonal de camundongo anti-CD15/SSEA-1 humano para citometria de fluxo - P22083

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de CD15/SSEA-1

• O epítopo CD15/SSEA-1 corresponde à estrutura glicânica Lewis X (LeX), sintetizada pela alfa-(1,3)-fucosiltransferase 4 (FUT4), codificada pelo gene FUT4.
• A FUT4 catalisa a transferência de fucose para a N-acetilglicosamina das cadeias de lactosamina do tipo 2 nas glicoproteínas, formando o antígeno CD15/SSEA-1, que medeia a adesão e a sinalização celular.
  Referências relacionadas:
  PMID:1702034 PMID:1716630 PMID:29593094
• Como membro da família das fucosiltransferases, a FUT4 também gera os epítopos sialil Lewis X e 6-sulfo sialil Lewis X, que atuam como ligantes de selectinas essenciais para o tráfego de leucócitos.
  Referências relacionadas:
  PMID:1716630 PMID:29593094
• Em determinados tipos celulares, a FUT4 pode fucosilar unidades internas de LacNAc para produzir o antígeno VIM-2, outro motivo de reconhecimento de selectinas.
  Referências relacionadas:
  PMID:11278338 PMID:1716630
• A FUT4 está localizada na membrana do aparelho de Golgi, onde desempenha sua função de glicosilação.
• A enzima é uma proteína de membrana do tipo II, de passagem única, com uma curta cauda citosólica, uma hélice transmembrana e um domínio catalítico no lúmen do Golgi.
• CD15/SSEA-1 é expresso em células mieloides humanas, promielócitos e populações linfoides, bem como em células-tronco embrionárias e em algumas células-tronco cancerígenas, atuando como um marcador imunológico e de desenvolvimento comum.
• A iniciação alternativa produz múltiplas isoformas de FUT4, e a proteína está sujeita à N-glicosilação, o que pode afetar sua atividade e estabilidade.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O anticorpo é gerado contra um peptídeo sintético derivado de CD15/SSEA-1 humano. Devido ao seu imunógeno peptídico, ele pode reconhecer a estrutura proteica da FUT4 ou o epítopo glicânico, dependendo do desenho do epítopo.
• Para citometria de fluxo, certifique-se de utilizar controles de isotipo apropriados e titule o anticorpo para obter uma coloração ideal. Considere o uso de EDTA ou dissociação celular sem enzimas para a coloração de células vivas, a fim de preservar os epítopos de superfície.
• CD15/SSEA-1 é um epítopo de carboidrato presente em múltiplas glicoproteínas; portanto, os padrões de coloração podem refletir uma distribuição glicânica mais ampla, além da expressão específica de FUT4. Valide a especificidade no sistema de amostra relevante.

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