mTOR Coelho pAb - P42345

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da mTOR

• mTOR (Alvo Mecanístico da Rapamicina) é uma proteína quinase serina/treonina que serve como um regulador central do metabolismo, crescimento e sobrevivência celular, integrando sinais de hormônios, fatores de crescimento, nutrientes, energia e estresse. Referências relacionadas: PMID:12087098 PMID:12150925 PMID:12150926
• Ela funciona dentro de dois complexos distintos: mTORC1 e mTORC2. O mTORC1 é sensível a nutrientes e promove processos anabólicos como síntese de proteínas, lipídios e nucleotídeos, enquanto o mTORC2 é insensível a nutrientes e regula proliferação, sobrevivência e organização do citoesqueleto ativando quinases AGC como AKT, PKC e SGK1. Referências relacionadas: PMID:15268862 PMID:15467718 PMID:18497260 PMID:21376236 PMID:24670654
• O mTORC1 fosforila diretamente reguladores-chave da tradução, incluindo EIF4EBP1 (4E-BP1) e RPS6KB1 (S6K), aumentando assim a tradução de mRNA e a biogênese de ribossomos. Referências relacionadas: PMID:12087098 PMID:12150925 PMID:12150926 PMID:24403073 PMID:29236692
• O mTORC1 também regula a síntese de lipídios via SREBF1 e suprime a autofagia fosforilando ULK1 e outras proteínas relacionadas à autofagia. Referências relacionadas: PMID:23426360 PMID:32561715 PMID:20537536
• A fosforilação mediada pelo mTORC2 da AKT em Ser473 é crítica para a ativação total da AKT, influenciando a sobrevivência, metabolismo e migração celular. Referências relacionadas: PMID:15268862 PMID:15467718 PMID:21376236 PMID:24670654
• Subcelularmente, a mTOR localiza-se dinamicamente em lisossomos, retículo endoplasmático, aparelho de Golgi, mitocôndrias, núcleo e vesículas citoplasmáticas em resposta a sinais de nutrientes e fatores de crescimento.
• A mTOR é amplamente expressa em tecidos, com os níveis mais altos observados no testículo.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína de fusão recombinante correspondente à região N-terminal (aminoácidos 1-300) da mTOR humana. Esta sequência é conservada entre humano, camundongo e rato, consistente com a reatividade cruzada relatada.
• Para Western blot (WB), espere uma banda em aproximadamente 289 kDa. Use porcentagem de gel e condições de transferência apropriadas para proteínas de alto peso molecular.
• Na imunoprecipitação (IP), o anticorpo pode precipitar a mTOR e seus componentes complexos associados; valide em condições nativas.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), a marcação pode aparecer em compartimentos citoplasmáticos, lisossomais e de membrana, dependendo do tipo celular e das condições de cultura. Inclua controles apropriados.
• As diluições e condições ideais devem ser determinadas empiricamente para cada aplicação e tipo de amostra.

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