Nanog Rabbit mAb - Q80Z64

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína Homeobox NANOG

• A proteína Homeobox NANOG (também conhecida como proteína associada a células ES 4, proteína de expressão específica de embrião precoce do tipo homeobox NK, fator de transcrição Homeobox Nanog) é um regulador de transcrição crucial para a massa celular interna e a proliferação e autorenovação de células-tronco embrionárias (ES) (PubMed:25825768). Referências relacionadas: PMID:25825768
• Impõe pluripotência às células ES e impede sua diferenciação em direção às linhagens de endoderma extraembrionário e trofoblasto. Bloqueia a diferenciação mesodérmica de células ES induzida por proteína morfogenética óssea através da interação física com SMAD1 e interferência no recrutamento de coativadores para complexos de transcrição SMAD.
• Atua tanto como um ativador quanto um repressor de transcrição. Liga-se de forma otimizada às sequências de consenso de DNA 5'-TAAT[GT][GT]-3' ou 5'-[CG][GA][CG]C[GC]ATTAN[GC]-3'. Liga-se ao promotor POU5F1/OCT4.
• Autoreprime sua própria expressão em células ES em diferenciação: após interação com ZNF281/ZFP281, recruta o complexo NuRD para seu próprio promotor, levando à repressão da transcrição.
• Quando superexpressa, promove a entrada das células na fase S e a proliferação.
• A localização celular é estritamente nuclear.
• Especificidade tecidual: não é expressa em oócitos e espermatogônias (em nível de proteína) e está ausente em muitos órgãos somáticos, ovário, testículo, fibroblastos e linhagens de células hematopoiéticas.
• O splicing alternativo e modificações pós-traducionais chave (por exemplo, fosforilação) podem regular sua atividade; classificada sob palavras-chave incluindo ligação a DNA, homeobox, ativador, repressor, proteína de desenvolvimento e proteoma de referência.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 160–305 do Nanog de camundongo, o que abrange o domínio homeobox e regiões adjacentes. Esta região é altamente conservada entre camundongo e humano, apoiando a reatividade cruzada observada. Verifique a especificidade em seu sistema modelo.
• Para Western blot, espera-se uma banda específica em ~34 kDa em lisados de células ES de camundongo. Use controles positivos e negativos apropriados (por exemplo, NIH/3T3 como negativo) para confirmar o desempenho do anticorpo.
• Em ensaios de ChIP, este anticorpo pode ser adequado para enriquecer loci genômicos ligados ao Nanog, como o promotor POU5F1; considere a otimização do cross-linking e a titulação do anticorpo.
• Para citometria de fluxo intracelular, certifique-se de permeabilização adequada e use controles de isotipo adequados. Titule o anticorpo para determinar a concentração ideal para seu tipo celular.

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