NCR3 Rabbit pAb para WB, ELISA - O14931

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NCR3

• O NCR3 (receptor de disparo de citotoxicidade natural 3), também conhecido como NKp30 ou CD337, é um receptor ativador de células natural killer (NK) codificado pelo gene NCR3.
• Funciona como um receptor de membrana celular que desencadeia a citotoxicidade das células NK ao se ligar a ligantes extracelulares como BAG6 e NCR3LG1, promovendo a morte de células tumorais.
• O engajamento do NCR3 pelo seu ligante BAG6 também promove a maturação de células dendríticas mieloides (DC), tanto eliminando DCs imaturas quanto induzindo a liberação de TNF-α e IFN-γ pelas células NK.
• O receptor é seletivamente expresso na superfície de todas as células NK em repouso e ativadas, com expressão fraca detectada no baço.
• Como uma glicoproteína transmembrana do tipo I, o NCR3 contém um domínio semelhante à imunoglobulina em sua região extracelular e depende de proteínas adaptadoras associadas (por exemplo, CD3ζ, FcεRIγ) para a transdução de sinais.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada a N e formação de uma ligação dissulfeto dentro do domínio Ig, que são críticas para o dobramento adequado e reconhecimento de ligantes.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, adicionando à diversidade funcional do receptor na vigilância imunológica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aa 19-135), que inclui a região semelhante à Ig de ligação ao ligante; portanto, espera-se que o anticorpo reconheça o receptor nativo na superfície celular.
• Para Western blotting em condições redutoras, considere uma quantidade de carregamento de 20-40 µg de lisado de linhagens de células NK (por exemplo, NK-92) ou células NK primárias ativadas, e valide a banda no peso molecular previsto (~22 kDa).
• Devido à glicosilação e à variação potencial de isoformas, o peso molecular observado no WB pode parecer ligeiramente maior; a inclusão de controles de desglicosilação ou o uso de linhagens celulares específicas podem ajudar a verificar a especificidade.
• Em ELISAs, o revestimento com proteína NCR3 recombinante ou formatos baseados em células pode ser explorado; condições de bloqueio e detecção apropriadas devem ser otimizadas para o sistema de ensaio específico.

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