Anti-NFATC4 de Coelho para WB e ELISA - Q14934

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da NFATC4

• NFATC4 (também conhecida como NFAT3) é um membro da família NFAT de fatores de transcrição, caracterizada por um domínio de ligação ao DNA conservado que reconhece a sequência consenso 5'-GGAAAAT-3'.
• Ela atua como um fator de transcrição regulado por Ca2+, trafegando entre o citoplasma e o núcleo após ativação dependente de cálcio.
• Em células T, a NFATC4 estimula a transcrição de genes de citocinas, incluindo IL2 e IL4, desempenhando um papel fundamental na ativação imunológica. Referências relacionadas: PMID:18347059, PMID:18668201, PMID:7749981
• A NFATC4 é essencial para o desenvolvimento embrionário do coração; ela regula genes cardíacos como NPPB/BNP e MYH7 e participa do metabolismo energético mitocondrial em cardiomiócitos.
• Ela promove a diferenciação de adipócitos ao se ligar ao promotor do gene PPARG e modular sua atividade transcripcional. Referências relacionadas: PMID:11997522
• No sistema nervoso, a NFATC4 contribui para a neurogênese hipocampal e a formação de memória de longo prazo, e ativa o promotor BACE1, influenciando potencialmente o processamento da APP. Referências relacionadas: PMID:25663301
• É amplamente expressa, com níveis elevados na placenta, pulmão, rim, testículo, ovário e coração; no hipocampo, localiza-se na gyrus dentado, neurônios CA3 e na fissura hipocampal.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 560-710) corresponde a uma região conservada entre a NFATC4 humana e de camundongo, o que suporta a reatividade cruzada esperada; sempre valide no contexto específico da sua amostra.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de ~95 kDa; utilize um gel de SDS-PAGE de baixa porcentagem e otimize as condições de transferência para proteínas de alto peso molecular.
• Como anticorpo policlonal, ele pode detectar múltiplos membros da família NFAT se os epítopos forem conservados; confirme a especificidade por experimentos de knockdown ou superexpressão no seu sistema celular.
• Para ELISA, os protocolos padrão para anticorpos policlonais devem ser otimizados quanto à concentração de revestimento e condições de bloqueio para alcançar uma relação sinal-ruído ideal.
• Dado o tráfego nuclear/citoplasmático da NFATC4, considere o fracionamento subcelular ou a estimulação (por exemplo, com ionomicina) para enriquecer as formas nucleares ativadas nas suas amostras.

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