Anticorpo Policlonal de Coelho NFS1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y697

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NFS1

• O NFS1 é uma cisteína dessulfurase pertencente à família de aminotransferases dependentes de fosfato de piridoxal de classe V. Serve como o componente central de entrega de enxofre do complexo de montagem de clusters ferro-enxofre (ISC) mitocondrial, catalisando a dessulfuração da L-cisteína em L-alanina e formando um intermediário persulfeto em seu sítio ativo de cisteína (PubMed:18650437, PubMed:29097656, PubMed:31101807).
• Como parte da maquinaria ISC, o NFS1 transfere enxofre persulfeto para a proteína de suporte ISCU de maneira dependente de FXN para iniciar a montagem do cluster [2Fe-2S]. O processo é concluído com equivalentes redutores do FDX2 e transferência de cluster mediada por chaperonas para apoproteínas alvo.
• Além da biogênese ISC, o NFS1 atua como doador de enxofre para MOCS3, participando da biossíntese do cofator molibdênio, destacando um papel duplo em vias essenciais de tráfego de enxofre (PubMed:18650437, PubMed:23593335).
• A proteína se localiza em múltiplos compartimentos subcelulares: mitocôndria, citoplasma, citosol, núcleo e centrossomo, refletindo sua ampla distribuição celular.
• A expressão tecidual é mais alta no coração e no músculo esquelético, com detecção adicional no cérebro, fígado e pâncreas.
• Palavras-chave e recursos do UniProt incluem iniciação alternativa, splicing alternativo, variante de doença (COXPD52), ligação de fosfato de piridoxal e identificação por proteômica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 208–457 do NFS1 humano. Esta região está dentro do domínio catalítico conservado, e o anticorpo resultante pode reconhecer o NFS1 de comprimento total e potencialmente certos isoformas de splicing. Valide a especificidade em seu sistema de amostra relevante.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 50 kDa. Use controles de carregamento apropriados e verifique o padrão de bandas no tecido ou linhagem celular de interesse.
• Em imunofluorescência e imunocitoquímica, antecipe padrões de coloração mitocondrial e citosólica. A coloração simultânea com marcadores de organelas é recomendada para confirmar a localização.
• O ELISA pode ser empregado para quantificar NFS1 recombinante ou endógeno. Otimize as condições de revestimento e a concentração de anticorpo usando uma curva padrão de antígeno conhecido.
• A reatividade cruzada é relatada para humano, camundongo e rato; para outras espécies, o alinhamento de sequência in silico e testes piloto são aconselhados.

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